高效解磷青霉菌菌株的筛选及解磷促生复合菌剂的研制

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:asqw_
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磷是植物生长发育所必需的营养元素之一,是植物体内核酸及多种酶、辅酶、ATP等的重要组成成分,植物所利用的磷主要是土壤中的有效磷,但是土壤中的磷95%以上为植物难以利用的无效磷。土壤中存在着大量解磷微生物,这些微生物能够将植物难以吸收利用的磷转化具有可溶性、可以被吸收利用的形式。本研究主要对实验室已保存的青霉菌株进行解磷作用的筛选并结合促生效果较好的细菌菌株研制出具有解磷促生效果的复合菌剂,主要研究结果如下:采用以Ca3(PO4)2作为唯一磷源的固体培养基对实验室保存的分离自山东栖霞、蓬莱、昌邑,辽宁大连、金州,秦皇岛,河北沧州等渤海湾果树重茬地块的青霉菌300余株进行解磷作用的初筛,得到具有解磷作用的菌株有:QM-13-2-1、QM-30-2-6、QM-12-1-1、QM-4-2-3、QM-12-3-3、QM-4-2-1、QM-4-1、QM-6、QM-7-1、QM-10、QM-11-3-2、QM-3-1、QM-9-1、QM-12-3-2。对初筛获得的14株有解磷效果的菌株的解磷能力进行定量测定分析,利用Ca3(PO4)2作为磷源的液体培养基接种不同菌株,测定液体培养基中可溶性磷含量和pH的变化。结果表明,青霉菌菌株QM-6、QM-10的解磷能力较高,震荡培养96小时,培养基中的可溶性磷含量均达到最大值,对应的最大值分别为1239.21mg/L,1386.93mg/L,培养过程中二者最小pH值分别为2.36、2.09。对两株解磷效果较好的菌株进行ITS测序测定,结果表明,这两株青霉菌株的ITS序列与草酸青霉(Penicillium oxalicum)序列的一致性为100%,结合菌株进行形态学、培养特征等初步确定QM-6和QM-10为草酸青霉(Penicillium oxalicum)。为避免高效解磷菌剂的作用机制单一,将筛选的解磷效果较好的两株真菌分别与实验室筛选的具有良好促生效果的多粘类芽孢杆菌(Peanibacillus polymyxa)H1-1、B1菌株,伯克氏菌(Burkholderiales)71-2菌株和部分木霉菌(Trichoderma)菌株及放线菌(Actinobacteria)进行平板对峙试验。结果显示,木霉菌、放线菌与筛选的解磷青霉菌之间均存在明显的抑制作用,而筛选的解磷青霉菌与H-1-1、B1、71-2菌株之间的抑菌率均在32%35%之间,抑菌作用不明显,由此认为,筛选的解磷青霉菌可以和上述三个细菌菌株进行复合使用,初步拟定的复合菌剂组合为:H1-1+QM-10、B1+QM-10、71-2+QM-10、H1-1+B1+71-2+QM-10;H1-1+QM-6,B1+QM-6、71-2+QM-6、H1-1+B1+71-2+QM-6。温室盆栽试验对复合菌剂的解磷促生效果进行评价,结果表明:土壤+菌剂的盆栽试验中,土壤添加H1-1+B1+71-2+QM-6处理及土壤添加QM-10+71-2处理的小麦植株全磷含量单组最高,分别达到13.66mg/盆、15.43mg/盆,与空白对照相比植株全磷含量分别提高85.19%,109.14%,对应的土壤有效磷含量分别为22.84mg/盆、15.37mg/盆。同样,这两个处理的小麦株高较对照分别提高29.25%、14.87%;植株鲜重分别高73.5%、96.37%,对小麦的促生效果优于同组其它菌剂。土壤+基质(1:1)+菌剂盆栽试验中,添加QM-6+B1处理及QM-10+71-2处理的小麦全磷含量单组最高,分别为25.41mg/盆、17.46mg/盆,与空白对照相比植株全磷含量分别提高125.99%,57.82%,对应的土壤有效磷含量分别为15.21mg/盆,11.20mg/盆。与此同时,这两个处理的小麦株高较对照分别要高29.25%、14.87%;植株鲜重较对照分别要高73.5%、96.37%,对小麦的促生效果要优于同组其它菌剂。综合以上两种盆栽试验的结果可以看出,复合菌剂H1-1+B1+71-2+QM-6及QM-10+71-2的解磷促生效果较好,可以进一步通过田间实验进行验证。
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