免疫活性肽是一类具有提高机体免疫系统功能、增强免疫细胞活性、增强机体抵抗外来细菌和病毒侵害能力的短肽,具有易被人体吸收和免疫源性低等诸多优点。目前通过酶法制备的生物活性肽,在经口服摄入人体时可能会在肠道被降解,并不能保证其生物活性。本研究针对目前酶法制备免疫活性肽的问题,采用模拟消化酶解的方式制备马氏珠母贝全脏器免疫活性肽,并以体外免疫活性为指标,结合超滤、凝胶层析、离子交换层析等技术对免疫活性肽精制,同时对制备的马氏珠母贝全脏器免疫活性寡肽组分的体内免疫活性机理作了初步探讨。以期为马氏珠母贝全脏器的高值化利用及免疫活性肽保健食品的开发提供理论依据和技术支持。主要的研究结果如下:(1)通过模拟胃肠消化的方式对马氏珠母贝全脏器进行酶解,并利用人工神经网络对胰蛋白酶及胰凝乳蛋白酶酶解阶段的工艺过程进行模拟优化。利用该方法获得的优化工艺参数为:复合酶添加量4500 U/g(m胰蛋白酶:m胰凝乳蛋白酶=6:1)、料水比1:2、酶解时间3.5 h,在此条件下,分子量于200 u-2000 u的活性肽得率可达到55%以上,并通过随机抽取酶解参数验证了预测的实验结果,与理论值相符。(2)利用超滤手段对马氏珠母贝酶解产物进行分离,通过对分离各组分的基本成分及分子量分布的研究,证明超滤分离能达到较好的分离效果;并对各超滤组分氨基酸成分进行研究,推测马氏珠母贝酶解产物氨基酸组成中存在较强的生物活性片段。(3)利用体外免疫活性实验作为指标,结合Sephadex G-25凝胶柱层析、Capto Q强阴离子交换色谱、Sephadex G-15凝胶柱层析、Superdex Peptide肽柱的分离手段对马氏珠母贝全脏器酶解产物超滤组分进行反复筛选纯化,获得了两个具有免疫活性的肽段,并利用电喷雾静电场离子阱串联质谱分别对两个活性肽进行结构表征。分离得到的免疫活性肽SP1的分子量为245.0,为二肽,肽序列为Ala-Arg/Pro-Met;免疫活性肽SP2的分子量为274.0,为二肽,肽序列为Val-Arg。通过对最终分离两组分SP1和SP2的体外免疫活性实验证明,这两个经过精制的免疫活性肽终产物在低浓度(0.3 mg/m L)时都表现出优异的体外免疫功能,在所有分离组分中,组分SP2的体外免疫性最强。(4)通过动物实验对马氏珠母贝免疫活性寡肽的体内免疫功能进行研究。结果表明,受试样品能够显著提高小鼠淋巴细胞的转化能力和体液免疫的水平(p<0.05),同时极显著地增强经抗原诱导的小鼠免疫应答能力(p<0.01);但对小鼠非特异性免疫功能的影响较小(p>0.05)。