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众所周知，年龄是影响颅脑损伤预后的重要因素之一，老年颅脑损伤存在着恢复慢、神经功能缺失严重、预后差、病死率高等特点，但是人们对其病理生理学机制还知之甚少。本研究以与颅脑损伤预后密切相关的神经生长因子（NGF）和凋亡相关基因（bcl-2和bax）的表达为切入点，利用免疫组化和原位杂交的方法以及计算机显微图像分析技术，分别从蛋白和mRNA水平上对老龄和幼龄大鼠液压脑损伤后上述基因的表达差异进行了对照研究，试图由此对老年颅脑损伤预后不良的病理生理机制作一些理论上的阐述。最后，使用β2受体激动剂克仑特罗（Clenbuterol,CLE）为干预手段，观察CLE对液压脑损伤后老龄和幼龄大鼠NGF、bcl-2和bax基因表达的影响，寻求改善老龄哺乳动物颅脑损伤预后的新药物。研究分三部分，摘要如下。 第一部分 老龄和幼龄大鼠液压脑损伤后NGF、bel-2、bax蛋白的表达 目的：研究衰老因素对颅脑损伤后神经生长因子（NGF）和凋亡相关基因（bcl-2,bax）蛋白表达的影响，探讨老年颅脑损伤恢复不良的分子生物学机理。方法：采用SD大鼠侧方液压打击颅脑损伤模型，应用免疫组化方法和计算机显微图象分析技术，比较老龄（15个月）和幼龄（2-3个月）大鼠脑损伤后12小时脑内NGF、bcl-2、bax蛋白的表达水平的差异。结果：液压打击伤后NGF、bcl-2、bax蛋白在损伤侧大脑皮层、海马表达明显增强，老龄组大鼠伤侧皮层NGF蛋白表达和bcl-2／bax蛋白表达比率均显著低于幼龄组（P＜0.05）。结论：衰老因素影响液压打击脑损伤后大鼠脑组织中NGF、bcl-2、bax蛋白的表达，NGF表达水平下降和bcl-2/bax蛋白表达比率降低可能是老年颅脑损伤恢复不良的重要原因。 第二部分 老龄和幼龄大鼠液压脑损伤后NGF、bcl-2、bax mRNA的表达 目的：研究衰老对颅脑损伤后NGF、bcl-2和baxmRNA表达的影响，从mRNA水平探讨老年颅脑损伤患者恢复不良的病理生理机制。方法：采用SD大鼠侧方液压打击颅脑损伤模型，应用原位杂交和计算机显微图像分析技术，观察老龄（15个月）和幼龄（2-3个月）大鼠脑损伤后12小时脑内NGF、bcl-2、baxmRNA表达差异。结果：液压打击伤后NGF、bcl-2、bax mRNA在损伤侧大脑皮层、海马表达均有不同程度的增加，老龄组大鼠伤侧皮层 NG和 bC12 InRNA表达显著低于幼龄组（前者P＜0刀5，后者P＜0刀1），相反，老龄组损伤侧皮层bax M却高于幼龄组（P＜0刀1）。结论：衰老因素影响液压打击脑损伤后大鼠脑组织中 NGF、hcf．2、bax rnRNA的表达，NGF和 bclZ ITI．－－－－xA的低水平表达以及 bax rnRNA的高表达可能是老年颅脑损伤恢复不良的重要原因。第三部分Clenhuterol对老龄和幼龄大鼠液压脑损伤后NGF、bclZ和hax基因表达的调节作用IN耍1 目的：观察p。受体激动剂Clenbuterol（CLE）对幼龄Q上个月)和老龄 （15个月）大鼠颅脑损伤后NGF、hcf－2和bax基因表达的调节作用差异，探讨CLE对不同年龄组大鼠受损脑组织的保护作用。方法：采用大鼠侧方液压打击颅脑损伤模型，实验组致伤后立即给予CLE＊．sing／kg，腹腔注射)，对照组给予等体积生理盐水，利用免疫组化和原位杂交的方法测定脑损伤后12小时各组大鼠脑组织NGF、hcf－2和bax蛋白和 W表达水平。结果：CLE可分别使幼龄组和老龄组大鼠伤侧皮层＊GF蛋白增加31．4％和105．9％（后者P＜0刀5）；＊＊E对各组间比卜2蛋白表达影响轻微，但可显著下调老龄鼠bax蛋白表达水平（P＜0刀 1）。原位杂交结果显示，CM可显著提高老龄大鼠NGFInRN的表达（P＜0刀1），使老龄大鼠bC12theA表达增加（P＜0刀5）bw表达下降（P＜0刀］）。结论：Cn可能通过提高老龄鼠NGF基因的表达并降低bax基因的表达而起到促进受损神经元修复和抗凋亡的作用，CLE对老年颅脑损伤患者的治疗可能具有较大的潜在价值。