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卵巢是雌性动物生殖系统重要的组成部分,主要功能是产生和排出卵母细胞及分泌性激素。卵巢分泌的性激素主要有雌激素,孕酮等,它们主要由卵巢颗粒细胞（granulosa cells,GCs）所分泌。性激素分泌异常会引起女性不孕,卵巢早衰等疾病。环状RNA（circular RNA,circ RNA）是一类具有闭合环状结构,能够调节基因表达的非编码RNA。近年来很多研究表明,circ RNA在调控细胞增殖,分化等方面具有重要的功能。然而目前关于circ RNA在卵巢中的功能研究还比较少,所以探究其在卵巢及卵巢颗粒细胞中的功能对诊断和治疗由激素分泌异常引起的疾病具有重要的意义。成年卵巢相对于新生卵巢,颗粒细胞发生了明显的增殖分化。我们选取这两个时期的小鼠卵巢,利用RNA外切酶（RNase R）消化其中线性RNA,然后通过高通量测序（RNA-Seq）技术,分析和比较成年及新生小鼠卵巢的circ RNAs表达谱。结果显示在成年和新生小鼠卵巢中有327个差异表达的circ RNAs,其中169个上调,而158个下调。通过对差异表达circ RNAs的GO（Gene Ontology）分析,我们发现这些circ RNAs参与了排卵周期,细胞增殖调控和生长发育等生物过程。通过KEGG（Kyotoencyclopedia of genes and genomes）通路分析,发现差异表达的circ RNAs参与了雌激素分泌,细胞连接和血管内皮生长因子等信号通路。其中,雌激素信号通路中差异表达的circ RNAs有5个,包括circ EGFR（circ RNA epidermal growth factor receptor）等。circ EGFR是由表皮生长因子受体基因转录形成,有报道称EGFR（epidermal growth factor receptor）参与调控细胞增殖,分化,细胞周期等过程。我们检测了circ EGFR在新生及成年卵巢中的表达量,发现其在成年小鼠卵巢中表达量明显高于新生卵巢。之后我们通过RNA原位杂交实验发现circ EGFR定位于卵巢中颗粒细胞的胞质。通过在颗粒细胞中过表达circ EGFR,我们发现circ EGFR过表达能够促进颗粒细胞分泌雌激素,但对分泌孕酮没有影响,同时circ EGFR过表达能够促进颗粒细胞增殖。此外在颗粒细胞中敲低circ EGFR,会抑制颗粒细胞分泌雌激素,同时能够促进颗粒细胞分泌孕酮,并诱导颗粒细胞凋亡。通过构建ce RNA（competing endogenous RNA）网络,我们发现circ EGFR可能吸附mi R-125a-3p,mi R-183-5p和mi R-1934-5p。其中mi R-125a-3p与circ EGFR的结合自由能最低（-30.5 kcal/mol）。随后我们通过CCK-8及Ed U实验,研究了mi R-125a-3p对颗粒细胞增殖的影响。结果显示,在颗粒细胞中过表达mi R-125a-3p能够抑制细胞增殖;而抑制mi R-125a-3p能够促进颗粒细胞增殖。然后我们通过双荧光素酶报告实验及RNA免疫共沉淀实验,验证了circ EGFR与mi R-125a-3p之间的互作。之后我们通过q PCR实验检测了过表达及干扰circ EGFR,对靶基因Fyn的影响。结果显示,过表达circ EGFR能够提高Fyn的表达,反之干扰circ EGFR可以降低Fyn的表达。说明在颗粒细胞中,circ EGFR作为mi RNA分子海绵吸附mi R-125a-3p,解除了对其靶基因Fyn的抑制,从而促进颗粒细胞增殖;而敲低circ EGFR会释放mi R-125a-3p,其靶基因Fyn的表达受到抑制,导致细胞增殖受到抑制。我们在新生卵巢高表达的circ RNAs中,发现GAS5（Growth arrest-specific 5）的环形转录本circ GAS5。GAS5被报道参与了卵巢生殖干细胞的增殖调控,而GAS5及circ GAS5在调控卵巢颗粒细胞增殖及激素分泌等方面的研究还未见报道。我们通过CCK-8及Ed U实验发现,过表达circ GAS5会抑制颗粒细胞增殖,干扰circ GAS5对细胞增殖没有显著影响;过表达GAS5会促进细胞增殖,干扰GAS5会抑制颗粒细胞增殖;同时过表达GAS5会促进颗粒细胞分泌雌激素。另外,在过表达circ GAS5的细胞中过表达GAS5,GAS5解除了circ GAS5对细胞增殖的抑制作用。以上结果说明circ GAS5抑制颗粒细胞增殖,而GAS5能够促进细胞增殖,并且两者在颗粒细胞增殖方面的功能是拮抗性的。综上所述,我们率先系统分析了新生及成年小鼠卵巢circ RNAs表达谱,构建了雌激素分泌相关的ce RNA网络,揭示了circ EGFR和circ GAS5在颗粒细胞增殖及激素分泌中的作用。本研究为后续发掘circ RNA调控卵巢细胞增殖,发育及激素分泌等方面的功能提供研究基础,从而为雌性不孕,卵巢早衰等疾病的诊断和治疗提供新的视角。