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地黄(Rehmannia glutinosa Libosch.)是玄参科(Scrophulariaceae)地黄属多年生草本植物,为我国栽培历史最悠久的药用植物之一,其块根是一种大宗常用中药材。在地黄栽培中,存在着严重的连作障碍,其原因至今不明。为了揭示导致连作障碍的原因,刘峰等从地黄适宜产区未种植过地黄的大田中分离了50株细菌,初步了解了其生物学特性,发现其水苏糖利用能力和氰化物产生能力差异显著。这提示种植地黄后根际特殊的营养状况可能会导致地黄根际微生态失衡,从而导致地黄连作障碍。
本文利用组织培养技术与盆栽试验,测试了各菌株对地黄试管苗和盆栽苗的影响,结合以前工作基础初步确定了有益菌和有害菌;通过拮抗试验,评价了有益菌和有害菌之间的拮抗关系;揭示了生地提取液对地黄试管苗的自毒作用,并证明有益细菌对生地提取液自毒作用具有缓解效应。主要研究结果如下:
1.不同菌株对地黄试管苗的生长影响显著。根据其作用效果,将细菌菌株分为四种类型:(1)促生菌,如6,23,24,28,29号菌,对地黄试管苗具有显著促进作用;(2)无显著影响菌,如4,12,13,34,41号菌,对地黄各生理指标均无显著影响;(3)抑制菌,如3,15,18,35号菌,对地黄苗植株干鲜重、植株高均有显著抑制作用;(4)致死菌,如11,26,37,48号菌,导致地黄苗死亡。
2.不同菌株对地黄盆栽苗的生长影响显著。其中,24号菌对植株干鲜重、根鲜重都有显著的促进作用,地黄苗壮,叶片大而厚,块根较大且多;28、29、34号菌对植株干鲜重、根干重都有显著的促进作用,地黄苗壮,叶片大而厚,根块根较大且多;可见24、28、29、34号菌具良好的促生作用。
3.细菌拮抗实验发现,有益菌与有害菌间存在拮抗关系。
4.本研究证明生地提取液对地黄试管苗具有显著的自毒作用,MS培养基中添加生地提取液可导致试管苗产生氧化损伤,使SOD、CAT、POD、APX酶活性下降,而使PPO酶活性升高,但与对照相比无显著性影响;导致不定根表皮细胞细胞壁木质化、栓质化和角质化。
5.本研究证明所选有益菌(6、7、21、23、24、28、29、34、43、45)对生地提取液的自毒作用具有显著缓解作用。
综上可知:土壤细菌对地黄的生长具有显著影响,生地提取液对地黄具有自毒作用,本研究所选有益菌对生地提取液的自毒作用具有显著缓解作用。
本文的创新点:
1.首次揭示了不同土壤细菌对地黄试管苗和盆栽苗的影响;
2.首次揭示了生地提取液对地黄具有自毒作用;
3.首次证明所选有益菌对生地提取液的自毒作用具有显著缓解作用。