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多杀菌素（spinosad）是由刺糖多孢菌（Saccharopolyspora spinosa）产生的大环内酯类生物农药,为一种具有触杀及摄食毒性的广谱杀虫剂。与一般的杀虫剂相比,多杀菌素兼具生物农药的安全性和化学合成农药的快速效果。本论文对多杀菌素菌种选育和发酵工艺进行了系统研究,主要对多杀菌素定量检测方法、高产菌株推理育种、发酵培养基响应面法优化、发酵条件优化及进行发酵罐小试。建立了一种快速有效的多杀菌素定量检测方法,并鉴定其线性范围、分析方法的准确度和精密度,并对样品预处理方法进行了研究。多杀菌素的HPLC检测方法的标准偏差为1.044,变异系数为0.415%,相关系数为r=0.99970,平均回收率为99.79%。样品预处理方法的研究试验显示,在室温下,采用100W的超声波处理10min的超声处理方式,浸提2h,最适浸提比例为:发酵液（全液）:甲醇=1:4,并将发酵液浸提pH调至9.0。在多杀菌素高产菌株的选育过程中,根据多杀菌素生物合成及代谢调节理论,通过六次紫外线诱变,分别筛选抗前体（鼠李糖、乙酸钠、丙酸钠）突变株、抗红霉素突变株、抗2-DOG突变株和抗磷酸二氢钠突变株,最终获得较出发菌株S.spinosa L-2效价提高2.2倍的高产变株S.spinosa 6-18,其摇瓶发酵效价达503.4mg/L。对发酵培养基以及培养条件进行了优化。采用响应面分析方法,对S.spinosa H-2产多杀菌素的发酵培养基进行优化研究。确定发酵产多杀菌素最佳培养基为葡萄糖64.5g,麦芽糖20g,玉米浆2g,大豆油40g,棉籽粉25g,黄豆饼粉2.4g,蛋白胨25g,CaCO35g,定容至1L,pH7.0。培养基优化后多杀菌素产量由278.1mg/L提高到508.7mg/L,比初始多杀菌素产量提高了1.83倍。并研究了S.spinosa S-15摇瓶培养条件,确定了最适接种量为10%,最佳接种时间为48h,最适放瓶时间是7d,消前pH为8.0,250mL三角瓶最佳装液量为25mL以及采用先高温30℃培养3d后,变温至28℃培养的变温发酵方法。最后,本文分别对不同的两株菌株S.spinosa H-2,S.spinosa 6-18进行5L罐小试,得到了各发酵阶段的菌丝体生长状况、还原糖、pH、溶氧及spinosad等参数随时间的变化曲线,并对补料操作进行了初步研究。S.spinosa 6-18在5L罐中多杀菌素的发酵单位达到636.7mg/L,比摇瓶发酵时提高了27%。