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植物内生真菌是指在生活史中的某一个阶段存在于健康植物组织内部,不会引起宿主明显病症或者对宿主造成明显伤害的真菌。丹参是双子叶植物唇形科鼠尾草属多年生直立草本植物,是一种常用的药用植物,具有活血祛瘀,通经止痛,清心除烦,凉血消痈之功效;三尖杉是一种常绿乔木,亚热带特有植物,产于浙江、安徽南部、福建、江西、湖南等省区,具有驱虫,消积,抗癌的功能,用于治疗咳嗽,食积,蛔虫、钩虫病。而次生代谢产物是指某些微生物生长到稳定期前后,以结构简单、代谢途径明确、产量较大的初生代谢物为前体,通过复杂的次生代谢途径所合成的各种结构复杂的化合物。目前大量的研究表明内生真菌次生代谢产物种类丰富、结构新颖、生物活性多样,是一座为人类提供生物活性物质的宝库。本课题组致力于药用植物内生真菌生物多样性、化学多样性和宿主相关性的研究。在前期研究中,课题组从丹参和三尖杉中分别分离并鉴定出了深绿木霉菌,分别编号为D16和S361,其中D16能产生丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA,而在S361次生代谢产物中并没有发现丹参酮类的物质。查阅文献后我们发现,有报道显示在不同宿主中生长的其它属的同种内生真菌能产生和宿主活性成分类似的次生代谢产物,我们猜想在D16和S361的次生代谢产物中是否也会出现类似的现象。本文对分离自浙江省建德市三尖杉的深绿木霉菌株(Trichoderma atroviride S361)和分离自陕西商洛丹参的深绿木霉菌株(Trichoderma atroviride D16)进行了系统的次生代谢产物及其生物学活性研究。采用大米培养基对D16菌株进行发酵培养,采用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、半制备高效液相色谱等方法对其发酵培养物中的次生代谢产物进行分离纯化,采用各种波谱数据(NMR,MS,IR,CD)以及文献对照等手段进行鉴定,共分离鉴定化合物17个,包括3个新化合物(3个倍半萜类的化合物)和14个已知化合物(包括了5个酯类化合物,2个酸类化合物,1个酚类化合物,1个醇类化合物,1个酮类化合物,3个倍半萜的化合物,1个二萜类化合物)。采用大米培养基对S361菌株进行发酵培养,采用硅胶柱色谱、OD柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、半制备高效液相色谱仪等方法对其发酵培养物中的次生代谢产物进行分离纯化,采用各种波谱数据(NMR,MS,IR,CD)以及文献对照等手段进行鉴定,共分离鉴定化合物16个,包括4个新化合物(2个酰胺类的化合物,1个倍半萜类的化合物,1个二萜类的化合物)和12个已知化合物(包括了3个内脂类的化合物,1个酚类的化合物,3个生物碱类的化合物,3个倍半萜的化合物,1个二萜类化合物,1个醌类的化合物)。在广泛查阅文献后,推测萜类的5个新化合物具有抗炎活性,采用LPS刺激的方式对相关化合物进行了抗炎生物活性测试,发现它们均没有抗炎活性。