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本研究从调控炎症介质基因表达的细胞内信号转导通路，探讨热休克反应(heat shock response，HSR)以及HSP70抑制LPS所致细胞因子表达的机制。 经采用RT-PCR、ELISA检测发现，大肠杆菌脂多糖(LPS)可诱导RAW264.7小鼠巨噬细胞产生大量TNF-α，IL-1β和IL-15等细胞因子。当细胞经受热休克反应(42.5℃1h，恢复12h)后再进行LPS刺激，则LPS诱导的细胞因子表达受到抑制。在此基础上采用过表达HSP70的RAW264.7细胞进行实验，发现HSP70同样抑制了LPS诱导的细胞因子表达。 鉴于细胞内信号转导通路在调控炎症介质基因表达中的作用，本实验采用磷酸化抗体检测MAPK信号通路的活化，分析了HSR以及HSP70对LPS所致MAPK信号通路活化的影响。Western blot结果显示，HSR以及HSP70自身均不影响MAPK的活化(磷酸化)。在LPS刺激30min后，HSR组以及HSP70过表达组中的JNK、ERK、p38的活化(磷酸化)程度与非HSR正常细胞组或转空载体细胞组比较均无明显区别。EMSA结果显示，HSR以及HSP70不影响LPS刺激所致的MAPK下游转录因子AP-1的DNA结合活性。据此我们认为，HSR以及HSP70不影响LPS所致的MAPK信号通路活化，其抑制LPS所致细胞因子表达的机制可能涉及其他因素。 由于NF-κB／IκB信号转导通路的活化在LPS所致炎症反应的发生中具有重要作用，我们进一步分析了HSP70过表达对LPS所致NF-κB信号通路活化的影响。通过免疫荧光、免疫细胞化学及Western blot