滑膜及软骨细胞释放HMGB1流体力学阈值的研究

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目的:(1)检测颞下颌关节紊乱病患者关节滑液中HMGB1的表达水平及临床意义。探究在流体剪切力(FFSS)作用下,滑膜细胞及软骨细胞释放HMGB1时流体力学的阈值;阐明异常机械力干预下,滑膜细胞及软骨细胞破坏的先后顺序;方法:(1)临床研究:收集诊断为颞下颌关节紊乱病(TMD)患者的关节滑液,根据临床表现及锥形束计算机断层扫描成像(CBCT)或磁共振成像(MRI)检查,分为颞下颌关节结构紊乱病(TMJID)组与颞下颌关节骨关节炎(TMJOA)组,其中TMJOA组分为I期、II期、III期。统计基线资料,收集滑液,采用ELISA法检测两组患者关节滑液中HMGB1的表达情况。(2)细胞学水平:分别采用1 dyn/cm~2、3 dyn/cm~2、5 dyn/cm~2、10 dyn/cm~2的FFSS干预滑膜细胞1h,采用4 dyn/cm~2、8 dyn/cm~2、12 dyn/cm~2、16dyn/cm~2干预软骨细胞1h,采用静息培养作为对照组,观察细胞的形态学变化、HMGB1的细胞表达分布、上清液中及细胞中HMGB1的表达水平。结果:(1)临床研究:TMJOA组患者的病程时间明显长于TMJID组,TMJID组主诉关节区下颌运动不畅的患者多于TMJOA组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。TMJOA组中I期、II期、III期患者关节滑液中HMGB1水平比较差异无统计学意义(P=0.377)。TMJOA组患者治疗前关节滑液中HMGB1水平明显高于TMJID组,差异有统计学意义(P=0.029)。两组患者治疗后关节滑液中HMGB1水平均明显低于治疗前(P<0.01)。两组患者治疗后开口度与治疗前相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。两组患者治疗后VAS评分均明显低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)细胞学水平:滑膜细胞及软骨细胞随FFSS升高,细胞逐渐肿胀,破裂,HMGB1的表达由胞核转移至胞浆,上清液HMGB1的表达水平及细胞中HMGB1蛋白的表达呈上升趋势。滑膜细胞在FFSS为1 dyn/cm~2时,上清液HMGB1的表达水平及细胞中HMGB1蛋白的表达呈显著上升趋势;软骨细胞上清液中HMGB1的表达在FFSS为8dyn/cm~2显著升高,而细胞中HMGB1表达下调。结论:(1)临床研究:高浓度的HMGB1表达于骨关节病滑液中,可考虑作为诊断疾病进展的潜在生物标志物。注射玻璃酸钠可明显降低TMD患者关节滑液中HMGB1的表达水平,减轻局部炎症,有效缓解患者的疼痛。(2)细胞学水平:滑膜与软骨细胞随FFSS增加出现溶胀破裂,释放HMGB1的流体力学阈值分别为1 dyn/cm~2和8 dyn/cm~2,滑膜损伤优先。
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