重组人甲状旁腺激素(1-34)对兔下颌骨牵张成骨各期作用的比较研究

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实验目的重组人甲状旁腺激素(1-34)对兔下颌骨牵张成骨各期作用的比较研究实验材料与方法选取约3月龄,体重为2-2.5Kg的日本大耳兔,雌雄不限28只,购入后观察期为一周,并随机分为4组(附图1.1),第一组:仅在牵张期七天,每日皮下注射重组人甲状旁腺激素(1-34)(浓度为50ug/kg,QD),第二组:仅在固定期前七天,每日皮下注射重组人甲状旁腺激素(1-34)(浓度为50ug/kg,QD),第三组:固定期每日皮下注射重组人甲状旁腺激素(1-34)(浓度为50ug/kg,QD)用药三周至处死,第四组:仅于间歇期每日皮下注射重组人甲状旁腺激素(1-34)(浓度为50ug/kg,QD),用药一周。每组7只。观察期结束后继而于兔的右侧下颌骨的无牙区纵形方向切开下颌骨建立牵张成骨模型,间歇期为7天,随即为牵张期,所有实验日本大耳兔都以0.5mm/12h的速率,牵张一周,而后进入固定期,固定期为期三周,三周后全部处死。四组实验动物固定期三周后处死,取牵张区及周围正常骨组织标本后置于中性甲醛溶液中,常温下一般需要固定24小时,然后取出并用清水冲净,而后以15%EDTA-2Na脱钙液中(PH值一般介于7.0-7.5),于4℃脱钙,每4-5天更换脱钙溶液,以探诊能轻松刺入骨质并且未感觉明显阻力为脱钙完成的指证。对标本行大体观察、组织学观察和VEGF、BMPs免疫组化染色分析且使用图像处理器行光密度值定量测定,并行Micro CT检查、骨密度值分析。实验结果全部实验动物均耐受牵张成骨手术及术后观察均无感染及其他并发症出现。1、大体观察:四组实验动物牵张区,都有新骨生成,连续性均较好,其中第三组的牵张区组织较其他三组颜色深,新生组织与牵张区边缘的连接最紧密,第二组颜色深度又优于第一、四组牵张区颜色,新生组织与牵张区边缘的连接程度也优于第一、四组。2、组织学观察:第二组、第三组比其他组新生血管数量形成及新骨形成较第一、四组多,差异具有统计学意义,第三组稍优于第二组,数据分析后发现差异有统计学意义。3、免疫组化显示第二组、第三组的VEGF、BMPs表达较其他组表达高,第三组稍优于第二组,差异有统计学意义。4、Micro CT显示:第三组的HU值及骨密度值较其他组高,前三组的HU值及骨密度值较第四组高,第二组与第三组HU值及骨密度值差异无统计学意义。实验结论1、50ug/kg重组人甲状旁腺激素(1-34)皮下注射可以促进兔下颌骨牵张成骨的骨形成过程。2、50ug/kg重组人甲状旁腺激素(1-34)作用于牵张成骨固定期初期一周的促进作用更明显。3、牵张成骨术术后用50ug/kg重组人甲状旁腺激素(1-34)效果较术前用药促进作用明显。
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