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目的:在肝硬化大鼠小体积肝移植模型的基础上,研究药物Rapamycin对于肝硬化大鼠小体积肝移植术后供肝损伤所能起到的作用;探讨肝硬化大鼠小体积肝移植术后供肝损伤中,Rho-ROCK信号通路及肝星状细胞的激活所起的作用。通过动物实验初步揭示药物Rapamycin的作用及相关机理,为今后进一步的实验研究及该药物的临床应用提供初步的数据。 方法:1.肝硬化大鼠小体积肝移植模型的建立 雄性健康Sprague-Dawley大鼠（330-380g）作为供体;雄性肝纤维化Sprague-Dawley大鼠（430-520g）作为受体。肝纤维化模型建立方法如下:雄性Sprague-Dawley大鼠,自出生后第六周起,每周两次皮下注射CCL4,剂量1ml·kg-1·次-1（溶于等体积橄榄油中）,共持续8周。2.实验分组 实验分为两组,小肝对照组（n=30）、小肝用药组（n=30）。各组在每一时间点上各包括6对大鼠肝移植。于再灌注后6、24、48小时取肝脏组织及血样进行相关指标的检测。各组均用12对大鼠来观察7天生存率。用药组的给药方法为:Rapamycin溶液由大鼠阴茎静脉推入（0.2mg/kg/次）。受体大鼠在术前24小时、麻醉之后开腹之前及再灌注之后分别给药一次;供体大鼠麻醉之后开腹之前给药一次。3.实验室研究 3.1 Masson’s染色:受体大鼠肝脏用10%福尔马林液固定,常规石蜡制片,应用Masson染色法将胶原纤维染为绿色以观察肝脏纤维化的程度。3.2 免疫组织化学染色检测α-SMA的表达 切片经脱蜡水化后,用1%H2O2灭活内原性过氧化物酶,加入30%小牛血清30分钟以减少非特异性的背景染色,加入α-SMA单克隆抗体（DAKO公司）,于4℃过夜。漂洗、加入二抗（DAKO公司）、显色、苏木素复染、乙醇和二甲苯脱水。阴性对照用PBS代替α-SMA单克隆抗体。3.3 ROCK I、Rho及VEGF的Western免疫印迹反应检测 提取各时间点肝脏标本的总蛋白,匀浆、裂解、取上清液、加热变性、电泳、转膜、曝光、呈像分析,检测各蛋白的表达水平。3.4 肝功能的检测:采集再灌注后6、24、48小时血样,测定血清天门冬氨酸转氨酶（AST）和丙氨酸转氨酶（ALT）的变化。 结果:1.成功建立肝硬化大鼠小体积肝移植模型 用Masson染色法将供体大鼠