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结肠癌是消化道常见的恶性肿瘤之一。最近的流行病学调查结果显示,结肠癌的发病率和病死率均居世界第三位。而肿瘤细胞的侵袭、迁移是结肠癌进展、死亡的主要原因,早期发现、早期治疗是提高结肠癌生存期的主要方法。目前针对结肠癌形成、进展、侵袭、迁移等过程的研究很多,认为其形成、进展、侵袭、迁移等过程与多种基因的突变、过表达或表达受抑、减少有关,但其具体机制仍不清楚。因此,通过对结肠癌形成、进展、侵袭、迁移等分子机制的研究,可能在结肠癌的筛查、治疗等方面寻找到新的临床思路。P52是核转录因子-κB(NF-κB)通路非经典激活方式的主要组成成分之一。NF-κB通路的活化分为经典和非经典两种方式。研究发现,NF-κB通路组成成分的过表达或基因突变均能够导致该通路的持续活化。NF-κB通路的持续活化能够导致其下游目标基因表达的上调,其中一些目标基因为调节细胞生命活动的细胞因子,如COX-2、VEGF、Bcl-2、Bax等,这些细胞因子的异常表达能够促进恶性肿瘤的发生、侵袭、迁移等过程。目前针对NF-κB经典激活方式有关成分的研究有很多,如在肝癌、结肠癌、乳腺癌等恶性肿瘤中发现P65、P50等高表达。而针对NF-κB非经典激活方式有关成分的研究也日益增多,如在食管癌、前列腺癌、宫颈癌等恶性肿瘤中发现P52高表达。钙蛋白酶小亚基1(Capn4)是构成钙蛋白酶(Calpains)家族成员的亚基,而Capn4作为Calpains家族成员的调节性小亚基,在维持Calpains家族成员的功能方面有着重要的作用。Calpains家族是体内重要的蛋白水解酶家族,其成员参与了体内多种生理功能及生命活动,如细胞骨架的重构、信号的转导、细胞的凋亡等,其成员的异常表达也参与了多种恶性肿瘤的形成、进展、侵袭、迁移等过程。近年来的研究显示,Capn4本身也促进了肿瘤的形成、进展、侵袭、迁移等过程,如肝癌、乳腺癌、鼻咽癌、非小细胞肺癌等。并且有研究发现Capn4是NF-κB通路的下游目标基因,NF-κB通路的持续激活可进一步促进Capn4的表达,从而促进恶性肿瘤的形成、进展、侵袭、迁移等过程。目前国内关于Capn4在结肠癌中的研究比较少见。本研究通过研究Capn4和P52在结肠癌中的表达及两者的相关性,进一步阐述了结肠癌形成、进展、侵袭、迁移等过程的分子机制,同时可能在结肠癌的筛查、治疗等方面寻找到新的临床思路。Ki-67又称细胞核增殖指数,能够反映细胞的分裂程度以及细胞的增殖活性,其表达水平越高,细胞的分裂程度及增殖活性就越高。Ki-67的表达情况与细胞周期相关,其能够在细胞的有丝分裂以后快速的降解,或者失去自身的抗原决定簇,因此能够比较全面地、可靠地、客观地评价细胞的增殖活性,目前临床上Ki-67蛋白的检测已经作为重要的指标之一,用于恶性肿瘤转归的评价。本研究通过对结肠癌中的Capn4、P52及Ki-67的表达情况进行检测,探讨Capn4、P52及Ki-67与结肠癌的临床病理特征之间的相关性,以及三者之间的相关性,进一步阐述了结肠癌形成、进展、侵袭、迁移等过程的分子机制,同时为结肠癌的筛查、治疗等寻找新的临床思路。目的:本研究针对结肠癌中Capn4、P52及Ki-67的表达程度进行检测,与癌旁正常组织中三者的表达程度进行比较,并且探讨Capn4、P52及Ki-67与结肠癌的临床病理特征的相关性,以及三者在结肠癌形成、进展、侵袭、迁移等过程中的相关性,同时预测Capn4及P52成为结肠癌新的标志物的可能性。方法:收集70例结肠癌组织及35例癌旁正常组织的存档蜡块,所有存档蜡块均经手术切除,并且术后经病理确诊。应用免疫组织化学的方法,对这些组织蜡块中Capn4、P52及Ki-67的表达水平进行检测,并分析Capn4、P52及Ki-67与结肠癌的分化级别、TNM分期、侵及的深度以及淋巴结的转移情况等临床病理特征的相关性。统计学方法:计数资料主要应用了χ2检验及秩和检验,数据之间的相关性分析主要应用了Spearman相关分析,以P<0.05为差异有统计学意义。结果:Capn4蛋白主要表达于细胞浆,P52蛋白在细胞核以及细胞浆中均有表达,Ki-67蛋白主要表达于细胞核,结肠癌组织中三者阳性率分别为74.3%(52/70)、70.0%(49/70)、84.3%(59/70),显著高于癌旁正常组织的22.9%(8/35)、31.4%(11/35)、17.1%(6/35)(P<0.05);并且在结肠癌组织中,Capn4、P52及Ki-67的表达情况均与结肠癌的TNM分期情况、侵及的深度情况及淋巴结有无转移情况密切相关(P<0.05),而与患者的年龄、性别以及结肠癌的分化级别情况无关(P>0.05);其中分期越晚者、侵及的深度越深者及有淋巴结转移者,Capn4、P52及Ki-67的表达程度就越高;并且三者中两两的表达呈正相关(Capn4与P52:r=0.869;Capn4与Ki-67:r=0.734;P52与Ki-67:r=0.638)(P<0.05)。结论:结肠癌中Capn4、P52及Ki-67的表达程度均显著增高,提示三者可能成为结肠癌检测的敏感指标。三者的表达程度在TNM分期Ⅲ~Ⅵ期者较Ⅰ~Ⅱ期者明显升高,侵及浆膜者较未侵及浆膜者明显升高,淋巴结转移阳性者较阴性者明显升高,提示Capn4、P52及Ki-67有可能成为预测结肠癌恶性程度及进展情况的新的指标。Capn4与P52呈明显正相关,可能致癌因子通过NF-κB的非经典途径促进Capn4的表达,从而影响结肠癌的侵袭、迁移等过程,提示Capn4和P52可能成为治疗结肠癌的新靶标。Capn4和P52均与Ki-67呈正相关,提示两者均有可能通过参与调节肿瘤细胞的细胞周期而发挥作用。