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背景与目的孕酮诱导阻断因子(progesterone induced blocking factor, PIBF)最初是作为γ/δTCR+的妊娠淋巴细胞分泌的免疫调节分子而被发现的，其可以帮助胚胎免疫逃逸，免于母体监视。PIBF在体内有两种形式：一种为全长PIBF，约为90-kDa，位于核内，无分泌功能；另一种为PIBF剪接体，大小不一，多为34-kDa，弥漫分布于细胞质内，具有分泌功能。目前已在多个肿瘤细胞系中证明全长PIBF高表达，但少有在人体组织及体液标本中检测的结果，而关于分泌型的PIBF剪接体与肿瘤的关系也是少有报道。我国是原发性肝癌的高发国家，其中，肝细胞性肝癌（Hepatocellular carcinoma，HCC）占90%以上，并且其最具诊断价值的肿瘤标志物AFP，就是一种常见的胚胎分泌蛋白。本课题拟通过检测HCC患者血清及组织中PIBF剪接体的表达，并寻求其在组织及血清中表达量与HCC增殖及分化程度的关系，探究PIBF剪接体在肝细胞癌中的表达及可能的临床意义。方法ELISA检测健康体检者及HCC患者血清中PIBF剪接体浓度。western blot检测正常肝组织、HCC癌组织及相应的癌旁组织中PIBF剪接体表达量。免疫组化检测HCC患者的癌组织及相应癌旁组织PIBF剪接体表达。符合正态分布的计量资料采用x±s表示；两样本间均值比较采用独立样本t检验或配对t检验；三样本间均值比较行单因素方差分析和LSD检验；列联表资料采用皮尔逊卡方检验；相关性分析采用Spearman等级相关检验；P＜0.05为差异有统计学意义。结果1. HCC患者血清中PIBF剪接体浓度为49.10±4.07ng/ml，健康体检者为73.04±6.29ng/ml（t=3.23，P=0.010）。HCC首发患者、HCC复发患者、健康体检者血清中PIBF剪接体浓度分别为52.06±5.05ng/ml、41.98±6.62ng/ml、73.04±6.29ng/ml（F=5.606，P=0.004），其中，HCC首发患者与HCC复发患者间P=0.375，HCC首发患者与正常人间P=0.011，HCC复发患者与正常人间P=0.005。术后第1天，HCC患者血清中PIBF剪接体浓度较术前降低（t=4.267，P=0.001），术后第5天，大部分患者术后血清中PIBF剪接体较术前增高（t=3.108，P=0.008）。首发的HCC患者复发后血清PIBF剪接体浓度为22.06±2.60ng/ml，较正常人低（t=2.972，P=0.004）。男、女健康体检者血清中PIBF剪接体表达量分别为80.14±1.23ng/ml、65.79±8.51ng/ml（t=1.142，P=0.256）。男、女HCC患者血清中PIBF剪接体表达量分别为49.28±4.85ng/ml、48.79±7.40ng/ml（t=0.057，P=0.955）。2.以β-actin为内参照，HCC癌组织中PIBF剪接体的相对表达量平均值为0.12±0.04，正常肝组织为0.63±0.20（t=2.479，P=0.039）。以GAPDH为内参照，相较于HCC癌组织，大部分患者癌旁组织中PIBF剪接体表达较高（t=2.385，P=0.049）。3. PIBF剪接体在HCC癌组织的高表达率为6.25%，癌旁组织中的高表达率为97.92%，两组评分比较，t=20.076，P=0.000。4. HCC癌组织中PIBF剪接体免疫组化评分与Ki67阳性细胞数百分比负相关（r=-0.714，P=0.000）。HCC癌组织中PIBF剪接体表达阳性率低中分化为81.8%，高分化为37.1%，（χ2=6.695，P=0.010）。5.血清中PIBF剪接体浓度及肝癌组织中Ki67阳性细胞数百分比负相关（r=-0.617，P=0.000）。低分化、中分化、高分化的HCC患者血清中PIBF剪接体浓度分别为21.16±3.53ng/ml、42.83±5.52ng/ml、72.76±7.52ng/ml（F=9.176，P=0.000），其中，低分化与中分化间I-J=21.67，P=0.019、低分化与高分化间I-J=51.60，P=0.000、中分化与高分化间I-J=29.93，P=0.007。结论1. HCC患者血清PIBF剪接体浓度显著降低，手术切除后其血清PIBF剪接体浓度可恢复正常水平，复发患者血清PIBF剪接体浓度低于正常。由此，血清中PIBF剪接体浓度的检测，对HCC疗效评价及预测复发有一定价值。2. HCC癌组织中PIBF剪接体含量低于正常肝组织，HCC患者癌组织中PIBF剪接体含量低于自身相应癌旁组织。3. PIBF剪接体表达与HCC癌组织中Ki67阳性细胞数百分比呈负相关，即PIBF剪接体表达量越低，细胞增殖能力越强。4. PIBF剪接体表达与HCC分化程度有关：PIBF剪接体表达量越低，肿瘤分化越差。