研究目的:通过构建大鼠颞下颌骨关节炎氧化应激模型,探讨羊膜间充质干细胞来源的外泌体在缓解颞下颌关节髁突关节软骨细胞氧化应激损伤中的作用,并为颞下颌关节病的治疗提供实验依据。研究方法:使用胰酶、胶原酶消化法提取大鼠颞下颌关节软骨细胞,甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原染色鉴定髁突软骨细胞,通过CCK8染色及细胞β-半乳糖苷酶(β-gal)染色筛选合适的过氧化氢(H2O2)浓度来建立大鼠颞下颌关节软骨细胞氧化应激模型。收集废弃的人胎盘组织上羊膜层,获取其中羊膜间充质干细胞,并对其进行间充质干细胞的初步鉴定后,使用超速离心法提取羊膜间充质干细胞来源的外泌体。在H2O2刺激下,检测对照组大鼠髁突软骨细胞蛋白中的氧化及抗氧化指标水平,炎症相关因子蛋白表达水平。再向上述培养体系中加入条件培养基以及终浓度为100μg/ml的外泌体,观察各组中氧化及抗氧化指标水平,以及炎症相关因子蛋白表达水平。实验结果:实验发现大鼠髁突软骨细胞甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原蛋白细胞化学染色均呈阳性,CCK8及β-gal染色测定H2O2最适宜浓度为100μmol/L。实验提取的人羊膜间充质干细胞为贴壁生长的成纤维样细胞,通过流式细胞术鉴定,证明该细胞的表面分子符合间充质来源,且具有多向分化能力。实验提取的外泌体直径在40至200nm之间,可以被软骨细胞内化,在0到1000μg/ml的范围中不会对软骨细胞产生细胞毒性。加入外泌体以及羊膜间充质干细胞的条件培养基后,软骨细胞的氧化应激指标水平、炎症相关因子蛋白水平均明显减少,抗氧化指标水平明显增加,其中外泌体组的变化更加显著。结论:本研究发现羊膜间充质干细胞来源的外泌体能够降低氧化应激损伤后大鼠髁突软骨细胞中氧化应激指标水平以及炎症因子相关蛋白水平,而抗氧化指标水平会明显升高。