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正常的朊蛋白(PrPC)是一种存在细胞膜上的神经元糖蛋白,起到神经保护作用;异常的朊蛋白(PrPSC)则在整个细胞内都有分布,并对细胞起到毒性作用。PrPC的功能以及PrPC如何转变为PrPSC等等问题迄今仍不清楚,因此,对朊蛋白家族其他成员的研究就显得至关重要。Shadoo蛋白是最近几年发现的一类与PrP蛋白类似的朊蛋白家族成员,而且Shadoo蛋白分布较广,在所有的哺乳动物中都存在,甚至鱼类中也存在。Shadoo和PrP蛋白都在中枢神经系统表达,而且表达位置重叠,都起到神经保护作用,这与表达在生殖系统的Doppel蛋白不同。因此,研究Shadoo蛋白在中枢神经系统的作用,可以为揭示PrPC的功能以及PrPC如何转变为PrPSC机制做出重要贡献。动物神经行为学的实验是评估动物神经状态的重要指标。神经行为学的研究内容包括确定蛋白功能,检测神经状况,评估心理状态等。本文采用的水迷宫和自主活动实验分别是检测小鼠学习和记忆能力及运动能力和神经状态的标准实验仪器。利用神经行为学实验,研究Shadoo蛋白高表达后,与野生型小鼠比较,可以得出Shadoo蛋白在体内表现出的部分生理功能。同时利用免疫组化,分子成像等实验技术对Shadoo蛋白在脑组织中进行定位,检测Shadoo蛋白的表达量,分析Shadoo蛋白高表达后脑组织的变化。利用双向电泳实验检测Shadoo蛋白高表达后引起的其他的蛋白表达变化。结果证明,在水迷宫定位航行实验中,转基因小鼠与野生型相比,实验的第四、五、六、七天的逃避潜伏期要少,而且第四天差异比较显著(P<0.05)。在空间搜索实验中,转基因小鼠第一次穿越平台的时间也要少于野生型小鼠。神经行为学实验还利用自主活动检测小鼠自发的活动次数。结果证明转基因小鼠的运动能力高于野生型小鼠,而且在实验的第一、四天差异比较显著(P<0.05),在实验的第二、三天差异极显著(P<0.01)。Western Blot结果显示,在脑组织中,转基因小鼠Shadoo蛋白的表达要高于野生型小鼠。免疫组化和分子成像结果显示在转基因小鼠的小脑区域,Shadoo蛋白表达量显著提高。双向电泳结果显示,在转基因小鼠脑组织中,共计有18个蛋白质差异蛋白质点。通过以上实验结果最终确定,Shadoo蛋白在小鼠体内高表达后,会提高学习和记忆能力;同时,小鼠的运动能力增强,表现出类似兴奋的神经状态。