以17个小白菜品种为试材，采用游离小孢子培养方法，研究了胚状体发生和发育、植株再生、再生植株继代及生根的影响因素，探讨了小孢子植株倍性鉴定方法。获得的双单倍体植株自交得到DH系，对DH系及其杂交组合的园艺学性状进行了鉴定，旨在建立高效的小白菜游离小孢子培养体系，并将其应用于优势杂交育种实践，加快育种进程。研究结果如下：1．确定了小白菜游离小孢子培养的适宜取样时期。花蕾形态特征与小孢子发育时期之间的关系分析表明，花蕾长2.0-3.49mm，花瓣／花药为1／2-5／4时，单核中晚期小孢子比例在75％以上。此时，最适合进行小孢子培养。2．不同基因型试材小孢子胚胎发生能力有很大差异。在17个品种中有15个诱导获得了胚状体，占供试材料的88.24％。其中，小白菜品种“菜园”的出胚率达到244胚／30蕾。3．较低的离子浓度有利于小白菜胚状体诱导。利用大量元素减半的1／2 NLN-13培养基不仅扩大了出胚基因型，而且胚状体诱导率得到了很大提高。4．6-BA和NAA对小孢子胚状体发生和发育有一定影响。适宜的浓度配比为“6-BA 0.05+NAA 0.1mg·L^-1”和“6-BA 0.05+NAA 0.2mg·L^-1”。5．培养基中添加适量的琼脂糖和活性炭对诱导胚状体发生及发育有促进作用，适宜添加量为25mg·L^-1琼脂糖和0.5g·L^-1活性炭。6．花蕾4℃低温预处理能提高小孢子胚诱导率，以处理24h的效果最好。花蕾低温预处理还有暂时保存材料而使其不降低培养效果的作用。7．游离小孢子培养初期33℃高温预处理对小孢子胚胎发生是必要的，处理时间以24h为宜。8．胚状体发育时期对胚成苗能力有很大影响，子叶期是将胚状体转移到成苗培养基上的适宜时期。9．诱导胚状体成苗的适宜培养基为“MS+3％蔗糖+1.0％琼脂+100mg·L^-1活性炭”，成活率达88.70％。10．“MS+3％蔗糖+0.8％琼脂”是小孢子植株继代和复壮培养的适宜培养基。“1／2MS+NAA0.1mg·L^-1+3％蔗糖+0.8％琼脂”和“MS+NAA0.1mg·L^-1+3％蔗糖+0.8％琼脂”是小孢子植株生根的适宜培养基。11．小孢子植株倍性鉴定可以采用染色体计数的直接鉴定法和比较形态学、气孔特征及花粉活力的间接鉴定法相结合的方法。最后还可以用自交结籽能力进行验证。12．从不同品种中诱导出的小孢子植株单倍体、双单倍体、高倍体和嵌合体比例不同。其中，双单倍体植株比例从41.30％到66.66％。13．小孢子培养获得的DH株系及其配制的杂交组合整齐一致，说明得到的DH株系为纯系，用其配制的杂交组合可以满足商用杂交种对整齐性的要求。14．小孢子培养获得的DH株系具有自交不亲和性，其不亲和程度达到了自交不亲和系的标准。