一、磁共振波谱技术无损伤测定骨骼肌组织谷氨酰胺含量的可行性研究 二、谷氨酰胺双肽强化的肠外营养对腹部手术病人谷胱甘肽水平的影响

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目的1.探讨应用磁共振波谱(MRS)技术无损伤测定新西兰兔骨骼肌组织中谷氨酰胺含量的可行性。2.探讨应用MRS技术无损伤测定健康成人骨骼肌组织中谷氨酰胺含量的可行性。方法1.选择新西兰兔22只,PRESS序列单体素法定位于实验动物右侧后肢膝关节上1cm肌肉组织,进行磁共振波谱数据收集,得到3.8ppm处谷氨酰胺+谷氨酸(GLx)峰高与3.0ppm处肌酸(Cr)峰高比值及GLx峰下面积/Cr峰下面积比值。之后于相同部位取肌活检,应用高压液相色谱法(HPLC)测定肌肉组织内谷氨酰胺+谷氨酸(GLx)实际含量。2.健康成人36名,男女各18名。平均年龄男性为28.7±4.1岁,女性为25.0±2.2岁;平均体重男性为67.6±7.4kg,女性为54.2±3.9kg;体质指数(BMI)男性为23.2±2.6,女性为20.1±1.3。PRESS序列单体素法定位于志愿者右侧下肢膝关节上15cm肌肉组织,进行磁共振波谱数据收集,得到GLx峰高/Cr峰高比值及GLx峰下面积/Cr峰下面积比值。3.对应用两种方法测定得到的数据,即应用MRS测定的GLx峰高/Cr峰高比值,GLx峰下面积/Cr峰下面积比值与应用HPLC测定的实际骨骼肌组织GLx含量/血Cr比值进行相关性、回归统计学分析。结果1.磁共振波谱测定22只新西兰兔右后肢肌肉GLx峰高/Cr峰高比值平均值为o。162±0.045;GLx峰下面积/Cr峰下面积比值平均值为0.092±0.065。高压液相色谱法测定相应部位肌肉活检组织中实际谷GLx含量,平均值为4.19±2.5μmol/g,与血肌酐水平比值平均值为4.576±0.599。SPSS统计分析MRS测定GLx峰高/Cr峰高比值与肌活检HPLC测定GLx含量/血Cr比值相关性,两者相关系数r=0.7(p=0.001),确定系数R~2=0.5,回归方程为Y=-1.550+37.783X;MRS测定GLx峰下面积/Cr峰下面积比值与肌活检HPLC测定GLx含量/血Cr比值相关性,两者相关系数r=0.6(p=0.001),确定系数R~2=0.42,回归方程为Y=2.189+25.927X;2.磁共振波谱测定36名健康成人右侧下肢肌肉GLx峰高/Cr峰高比值平均值为0.259±0.074,其中男性为0.230±0.06,女性为0.289±0.07;磁共振波谱测定36名健康成人右侧下肢肌肉GLx峰下面积/Cr峰下面积比值平均值为0.243±0.12,其中男性为0.209±0.11,女性为0.277±0.13。结论磁共振波谱技术无损伤测定兔骨骼肌组织中谷氨酰胺含量具有一定的可行性,但是此方法仍存在特异性欠佳,稳定性较差的不足。背景谷胱甘肽是一种三肽化合物,是机体重要的抗氧化物,其含量的高低及还原型/氧化型谷胱甘肽比值(GSH/GSSG)可以反映机体抗氧化能力状态;谷氨酰胺是一种条件必需氨基酸,与谷胱甘肽具有内在相关性,能够提供合成谷胱甘肽的前体物质。目的1.观察腹部外科手术创伤对病人术后血浆、红细胞谷胱甘肽水平、血浆GSH/GSSG比值、免疫功能及肝功能的影响;2.探讨谷氨酰胺双肽强化的肠外营养对腹部外科手术病人术后血浆、红细胞谷胱甘肽水平、血浆GSH/GSSG比值、免疫功能、肝功能及术后感染发生率、住院天数的影响。方法采用随机、对照、盲法,选择腹部外科择期手术病人40例,按随机表分为研究组与对照组,围手术期进行完全肠外营养支持(TPN)7天:两组分别于术前1天至术后6天给予等氮、等热量的肠外营养支持,非蛋白热量为20kcal/kg.day;糖:脂为7∶5。氮量为0.16g/kg.day;热、氮比为117kcal∶1g。其中对照组给予不含谷氨酰胺双肽的传统TPN,研究组给予TPN+谷氨酰胺双肽(20%Depipetiven 100ml,含有丙氨酰-谷氨酰胺双肽20 g,谷氨酰胺13.46 g,丙氨酸8.2 g)。分别于术前、术后第1天,第3天及术后第6天测定血浆、红细胞谷胱甘肽水平,GSH/GSSG比值,血生化指标(ALT,ALB,淋巴细胞计数),免疫球蛋白指标(IgG,IgM,IgA)及T淋巴细胞亚群(CD4,CD8,CD4/CD8)。结果与术前相比,对照组病人术后血浆及红细胞内谷胱甘肽水平均呈下降趋势,其中血浆谷胱甘肽水平术后第1,3,6天分别为(4.94±1.18 umol/L;4.90±1.20 umol/L;5.15±0.95 umol/L),红细胞谷胱甘肽水平术后第1,3,6天分别为(6.47±2。14 uM/g;6.37±2.79 uM/g;6.70±3.27uM/g)。给予谷氨酰胺强化的研究组病人血浆及红细胞内谷胱甘肽水平术后第1,3,6天无明显下降,其中红细胞谷胱甘肽水平术后3,6天较术前有增长趋势(8.19±3.44 uM/g;7.89±1.70 uM/g),分别增加14%及9%;研究组术后第3天血浆GSH/GSSG比值明显高于对照组(52.53±11.46 vs 31.43±7.27,P=0.001)。与术前相比,术后1,3,6天两组谷丙转氨酶(ALT)均轻度升高,无显著差异(P>0.05);两组术后血浆白蛋白(ALB)均轻度下降,但研究组术后第3天ALB水平明显高于对照组(3.77±0.38 g/dl8vs 3.38±0.42g/dl,P=0.02)。术后两组淋巴细胞计数均下降,无显著差异,P>0.05;术后两组免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA),T淋巴细胞亚群(CD4,CD8及CD4/CD8)指标无显著差异。研究组术后无感染发生,对照组术后1例发生切口感染。研究组住院天数较对照组有缩短趋势,(22.3±2.1天vs 24.9±1.7天,P>0.05)。结论1.腹部手术创伤应激能够造成机体血浆及红细胞还原型谷胱甘肽水平下降;造成血浆GSH/GSSG比值下降;造成机体肝脏功能轻度异常(转氨酶升高及ALB水平下降);2.围手术期应用谷氨酰胺双肽强化的肠外营养具有维持机体血浆及红细胞内谷胱甘肽水平的趋势,维持较高的GSH/cSSG比值:能够维持术后ALB水平,具有减少术后并发症,减少住院天数的趋势。通过维持谷胱甘肽水平达到抗氧化,保护组织、细胞功能,促进病人术后康复的目的。
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