阴沟肠杆菌质粒介导的碳青霉烯酶及传播机制研究

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碳青霉烯酶是指对亚胺培南或美罗培南等碳青霉烯类抗生素有较强水解作用的一类 β-内酰胺酶。现已发现的碳青霉烯酶属于Ambler分子分类中的A、B、D类。在肠杆菌科细菌中,已发现的碳青霉烯酶主要是A类酶和B类酶。A类酶较少见且大多由染色体介导,而质粒介导的碳青霉烯酶其耐药性可在不同菌种、不同种属间传播,对临床治疗带来巨大困难。 我们对2001年8月在一尿毒症患者血液中分离到一株亚胺培南耐药阴沟肠杆菌的耐药机制进行了研究。采用Etest条测定抗菌药物最低抑菌浓度(MIC),通过等电点聚焦电泳(IEF)、改良三维试验、接合试验、Southern杂交、聚合酶链反应(PCR)、酶切克隆筛选,鸟枪法及步移法测序,对酶的活性、耐药基因及其传播机制进行研究。 结果显示该亚胺培南耐药阴沟肠杆菌能产生一新的质粒介导的IMI-3型碳青霉烯酶,该酶能水解青霉素类、碳青霉烯类抗生素,而水解头孢噻肟和头孢他啶能力较弱,其水解活性能被克拉维酸抑制,不能被氯唑西林、EDTA抑制,与染色体介导A类碳青霉烯酶某些特性相似,等电点为8.1。编码基因IMI-3位于一大小为80kb的可接合性质粒上,与染色体介导的IMI-1有99%的同源性在编码基因IMI-3的
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