拟南芥suc4p/psal双突变体的创制及SUC4功能分析

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蔗糖转运蛋白是一类介导细胞跨膜转运蔗糖的膜蛋白,对植物的生长发育起着至关重要的作用。我们的前期研究表明,拟南芥蔗糖转运蛋白AtSUC4与拟南芥光系统I亚基L蛋白(AtPsaL)发生了功能性互作,并将其互作部位定位在叶绿体上。为了进一步了解蔗糖转运蛋白与光系统的联系,本文在实验室前人的研究基础上,利用反向遗传学的方法主要研究了AtSUC4与AtPsaL的互作功能。  通过拟南芥 suc4p/psal双突变体的创制获得四种双突变纯合体。观察表型发现atsuc4p/atpsal-1、atpsal-1/atsuc4p以及atpsal-2/atsuc4p与野生型有着显著区别,具体表现为植株矮化,莲座叶叶面积减小,叶片边缘向内轻微卷曲,果荚增多且排列紧密。但是atsuc4p/atpsal-2表型与野生型基本一致。Real-Time PCR实验定量分析拟南芥各突变体SUC4、PSAL表达水平,发现atsuc4p与atpsal正反交双突变纯合体植株,SUC4的表达水平相对于atsuc4p略有下调,PSAL表达水平则与其对应atpsal亲本一致。  利用 esculin溶液被吸收与否检测蔗糖转运蛋白的蔗糖转运活性试验证明了麻风树蔗糖转运蛋白JcSUT1具有转运蔗糖的功能,并且这种方法适用于多种酵母菌株,包括蔗糖转化酶未发生突变的野生型酵母菌株,这为日后检测蔗糖转运蛋白蔗糖转运活性提供了新思路。
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