[目的]在含牛α-S1-酪蛋白调控序列的乳腺特异性定位表达载体pCA1基础上，构建乳腺细胞绿色荧光蛋白表达载体pCA1-GFPuv，转染分离培养的兔原代乳腺上皮细胞并检测启动子活性与组织特异性。 [方法]用PCR法获取绿色荧光蛋白基因(即GFPuv基因)，将其重组到乳腺特异性定位表达载体pCA1中，构建乳腺细胞特异绿色荧光蛋白表达载体pCA1-GFPuv，直接从兔乳汁中分离兔原代乳腺上皮细胞进行培养，通过脂质体法用pCA1-GFPuv转染乳腺上皮细胞，最后在倒置荧光显微镜下观察荧光表达情况以检测乳腺特异性启动子活性与组织特异性。 [结果]限制性内切酶酶切确认并经测序证明正确地构建了乳腺细胞特异绿色荧光蛋白表达载体pCA1-GFPuv，经脂质体法转染原代乳腺上皮细胞后，在倒置荧光显微镜下可以观察到GFPuv表达。 [结论]成功地在兔原代乳腺上皮细胞中表达了GFPuv基因，证明所构建的乳腺特异性定位表达载体pCA1是有效的。