硫化氢（hydrogen sulfide,H₂S）和过氧化氢（hydrogen peroxide,H₂O₂）是参与植物体内信号转导过程的重要组分,但H₂S在暗诱导气孔运动过程中的作用以及其与H₂O₂之间的关系尚不清楚。本实验以蚕豆（Vicia faba L.）、拟南芥野生型（col-0）及其H₂S和H₂O₂合成突变体（atl-cdes、atl-cdes、atrbohD、atrbohF、atrbohD/F）为材料,采用药理学试验、激光共聚焦显微技术以及分光光度检测法,对上述问题进行了研究。本文的研究结果如下:1、蚕豆表皮条经一系列浓度梯度的NaHS溶液处理1.5h后,检测到≥0.05 mmol·L^-1NaHS能显著抑制其气孔开度,且具有浓度依赖效应。另外,洗脱实验结果发现,0.05mmol·L^-1和0.1 mmol·L^-1的NaHS溶液处理后的表皮条,洗脱1.5h后其气孔开度还能恢复到对照水平。以上数据可以得出,外源H₂S可以诱导蚕豆气孔关闭;2、H₂S清除剂HT,H₂S合成酶（L-/D-CDes）抑制剂AOA和NH₂OH以及该酶的分解产物C₃H₃KO₃和NH₃都不同程度的逆转暗调控的蚕豆和拟南芥野生型气孔关闭效应,且暗中两种植物叶片内H₂S积累以及L-/D-CDes活性均显著增加;另外,暗可以调节拟南芥野生型气孔关闭,而对拟南芥L-/D-CDes基因T-DNA插入突变体atl-cdes及atd-cdes气孔开度影响不显著。以上结果表明,H₂S在暗调控的蚕豆和拟南芥气孔关闭中有一定的促进作用,且L/D-CDes可能是H₂S合成的关键酶之一。3、蚕豆表皮条用不同浓度的H₂O₂光下处理3h后,测得H₂O₂≥100μmol·L^-1 H₂O₂可以显著诱导蚕豆气孔关闭,且其诱导程度具有浓度效应。表明外源H₂O₂可以抑制蚕豆气孔张开。4、暗诱导的蚕豆气孔关闭以及内源H₂O₂水平的增加能被H₂O₂清除剂ASA、CAT或H₂O₂合成抑制剂DPI、SHAM所抑制,ASA、CAT、DPI以及SHAM对暗诱导的拟南芥野生型气孔关闭有相同的作用;另外,暗可以促进野生型及拟南芥NADPH氧化酶（NOX）基因功能缺失单突变体atrbohD气孔关闭,而其单突变体atrbohF和双突变体atrbohD/F气孔开度在暗中与光下并无显著差异,以上结果表明,H₂O₂参与暗调控的蚕豆和拟南芥气孔关闭,且可能通过NOX途径形成。5、H₂O₂清除剂ASA、CAT及其合成抑制剂DPI、SHAM对NaHS介导的蚕豆气孔的关闭并无显著作用,但ASA、CAT、DPI及SHAM可以显著抑制暗调控的蚕豆和拟南芥野生型叶片L-/D-CDes活性的增强和内源H₂S的产生;而H₂S清除剂HT以及其合成抑制剂AOA、NH₂OH和C₃H₃KO₃+NH₃对暗诱导的蚕豆和拟南芥野生型保卫细胞H₂O₂水平并无显著作用;此外,与光下相比,暗对atrbohF和atrbohD/F叶片H₂S产生和L-/D-CDes活性无显著影响,而暗处理后测得atl-cdes及atd-cdes保卫细胞H₂O₂水平显著高于光下。以上数据表明,H₂S在H₂O₂下游参与调控暗诱导的气孔关闭过程。