人外周血内皮前体细胞的分离与体外培养

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本文对人外周血内皮前体细胞的分离与体外培养进行了探讨。本研究分别用全血Ficoll-hypaque密度梯度离心法和富集白细胞Ficoll-Hypaque密度梯度离心法从健康人志愿者外周血中分离外周血单个核细胞,对两种分离方法的分离效果进行了比较。将分离后的PBMCs在包被有纤连蛋白的培养板上,分别在增补了胎牛血清、血管内皮生长因子、碱性成纤维生长因子和血小板生成素等生长因子和细胞因子的M199-20完全培养基中和未增补生长因子和细胞因子的M199-20完全培养基中培养。结果显示:与在未增补生长因子的培养液中培养比较,在增补生长因子的培养液中培养收获的细胞白细胞共同抗原CD45表达率低,CD34和KDR表达率高,CD133几乎不表达;多数细胞Dil-acLDL吞噬试验和FITC标记UEA-1结合试验呈双阳性。
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