莲蓬壳自由基清除能力及对细胞氧化损伤保护作用的研究

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自由基为人体正常代谢产物,当机体受到紫外线照射、化学污染等外界刺激后,机体内抗氧化体系失衡,进而导致核酸、线粒体等细胞器受损,机体出现病变。莲蓬壳为睡莲科多年生草本植物莲(Nelumbo nucifera Gaertn.)的干燥成熟花托,主要用于止血抑菌、保护心肌等。本试验以莲蓬壳为试验材料,探究莲蓬壳清除自由基能力及对氧化损伤细胞的保护作用。主要包括莲蓬壳总黄酮提取条件的优化、莲蓬壳中活性物质的筛选、鉴定活性物质的结构及活性物质对过氧化氢损伤细胞的保护作用。研究结果如下:(1)将莲蓬壳总黄酮提取率作为指标,研究了超声提取时间、提取温度、液料比及乙醇体积分数对总黄酮提取率的影响。采用响应面分析法优化得到最佳工艺条件:液料比40 m L/g,乙醇体积分数为48%,提取温度60°C,提取时间10 min。(2)以清除自由基能力为指标,考察了莲蓬壳不同极性部位的抗氧化能力。结果表明,莲蓬壳不同极性部位均具有剂量依赖性抗氧化作用,其中以中等极性乙酸乙酯活性最强。(3)采用制备型高效液相、电喷雾质谱仪以核磁共振方法新型检测手段对莲蓬壳乙酸乙酯部位的活性物质进行结构鉴定。与相关文献对比,确定此物质为槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside)。(4)分子模拟结果初步表明,槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(QOG)可能通过抑制NF-?B的活化途径对H2O2诱导损伤CCD-986sk细胞起到保护作用。
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