论文部分内容阅读
目的:通过高效液相法检测荆芥不同煎煮时间对荆芥汤中胡薄荷酮含量的影响;通过致热法、致急性炎症法、致痛法、致咳法复制感冒相关动物模型,观察荆芥不同煎煮时间对荆芥汤解热作用、抗炎作用、镇痛作用、止咳作用、免疫功能的影响。探讨荆芥在荆芥汤中最佳煎煮时间,为荆芥特殊煎煮方法的临床应用提供实验依据。方法:采用高效液相法检测荆芥不同煎煮时间对荆芥汤中胡薄荷酮含量的影响,色谱条件:Inertsil ODS-3柱(250×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-水(80:20),柱温30℃,流速1 mL/min,检测波长252 nm。采用15%酵母混悬液致热法、蛋清致急性炎症法、热板致痛法、25%氨水致咳法复制感冒相关动物模型,观察感冒相关模型动物体温、足趾肿胀率、痛阈值、咳嗽潜伏期、咳嗽次数、脾脏系数、胸腺系数、脾脏中淋巴细胞亚群(CD4、CD8)变化、血清中免疫因子(IL-1、IL-6)水平。结果:高效液相法检测,胡薄荷酮对照品溶液进样量在1~15μL(0.143~2.145μg)范围内与峰面积呈良好的线性关系(r~2=0.9995);1号汤剂(荆芥煎煮2.5min组)供试品溶液中胡薄荷酮含量为0.738mg/g;2号汤剂(荆芥煎煮5min组)供试品溶液中胡薄荷酮含量为0.896mg/g;3号汤剂(荆芥煎煮7.5min组)供试品溶液中胡薄荷酮含量为1.040mg/g;4号汤剂(荆芥煎煮10min组)供试品溶液中胡薄荷酮含量为0.827mg/g;5号汤剂(荆芥煎煮12.5min组)供试品溶液中胡薄荷酮含量为0.713mg/g;6号汤剂(荆芥煎煮15min组)供试品溶液中胡薄荷酮含量为0.677mg/g。体温检测,与空白对照组比较,模型组在注射15%酵母混悬液后1h、2.5h、3h、4h、5h、6h、7h、8h时,体温明显升高(P<0.05或P<0.001);与模型组比较,阳性对照组1(阿司匹林肠溶片)、阳性对照组2(感冒疏风胶囊)、荆芥煎煮5min、7.5min、10min组在注射15%酵母混悬液后1h、2.5h、3h、4h、5h、6h、7h、8h时,体温明显降低(P<0.05或P<0.01或P<0.001);荆芥煎煮2.5min组在注射15%酵母混悬液后1h、4h、5h、6h、7h、8h时,体温明显降低(P<0.05或P<0.01或P<0.001);荆芥煎煮12.5min、15min组在注射15%酵母混悬液后4h、5h、6h、7h、8h时,体温明显降低(P<0.01或P<0.001)。足趾肿胀率检测,与空白对照组比较,模型组在注射蛋清液后0.5h、1h、2h、3h、4h时,足趾肿胀率明显升高(P<0.001);与模型组比较,阳性对照组1(阿司匹林肠溶片)、阳性对照组2(感冒疏风胶囊)、荆芥煎煮2.5min、5min、7.5min、10min组在注射蛋清液后0.5h、1h、2h、3h时,足趾肿胀率明显降低(P<0.05或P<0.01或P<0.001);荆芥煎煮12.5min组在注射蛋清液后0.5h、2h、3h、4h时,足趾肿胀率明显降低(P<0.01或P<0.001);荆芥煎煮15min组在注射蛋清液后0.5h、2h时,足趾肿胀率明显降低(P<0.001)。痛阈值检测,与空白模型组比较,阳性对照组1(阿司匹林肠溶片)、阳性对照组2(感冒疏风胶囊)、荆芥煎煮2.5min、5min、7.5min组痛阈值明显升高(P<0.001)。咳嗽潜伏期、咳嗽次数检测,与空白对照组比较,阳性对照组1(枸橼酸喷托维林片)、阳性对照组2(感冒疏风胶囊)、荆芥煎煮2.5min、5min、7.5min、10min组咳嗽潜伏期明显升高(P<0.001);阳性对照组1(枸橼酸喷托维林片)、阳性对照组2(感冒疏风胶囊)、荆芥煎煮2.5min、5min、7.5min、10min、12.5min、15min组咳嗽次数明显降低(P<0.01或P<0.001)。脾脏、胸腺指数检测,与空白对照组比较,阳性对照组1(枸橼酸喷托维林片)、阳性对照组2(感冒疏风胶囊)、荆芥煎煮7.5min、10min组脾脏系数明显升高(P<0.01或P<0.001);阳性对照组1(枸橼酸喷托维林片)、阳性对照组2(感冒疏风胶囊)、荆芥煎煮7.5min、10min、12.5min、15min组胸腺系数明显升高(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。流式细胞术检测,与空白对照组比较,阳性对照组1(枸橼酸喷托维林片)、阳性对照组2(感冒疏风胶囊)、荆芥煎煮2.5min、5min、7.5min、10min、12.5min组CD4水平明显升高(P<0.05或P<0.001);阳性对照组1(枸橼酸喷托维林片)、阳性对照组2(感冒疏风胶囊)、荆芥煎煮5min、7.5min、10min组CD8水平明显升高(P<0.001)。酶联免疫法(ELISA)检测,与空白对照组比较,阳性对照组1(枸橼酸喷托维林片)、阳性对照组2(感冒疏风胶囊)、荆芥煎煮2.5min、5min、7.5min、10min、12.5min组IL-1水平明显升高(P<0.05或P<0.01或P<0.001);阳性对照组1(枸橼酸喷托维林片)、阳性对照组2(感冒疏风胶囊)、荆芥煎煮2.5min、5min、7.5min、10min、12.5min组IL-6水平明显升高(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。结论:在煎煮过程中,荆芥煎煮7.5min时荆芥汤中胡薄荷酮含量最高,对感冒相关模型动物体温、足趾肿胀率、痛阈值、咳嗽潜伏期、咳嗽次数、免疫功能均有明显的改善作用。荆芥在荆芥汤中使用特殊煎煮方法(即“后下”),可能达到提高临床疗效的作用。