背景：　　胰腺癌是发病率和死亡率极高的恶性肿瘤之一。绝大多数胰腺癌患者诊断时已丧失手术机会，因此化疗成为胰腺癌患者的重要治疗与辅助治疗手段之一。然而胰腺癌化疗耐药性普遍存在，严重影响胰腺癌治疗效果。因此能否预测化疗药物对特定患者的有效性，能否实现个体化的化疗方案，能否逆转化疗耐药性是目前关于胰腺癌化疗研究的核心问题。研究表明，microRNA广泛参与各种肿瘤细胞的耐药产生，且由于其自身的很多特点在疾病诊断和治疗方面具有突出优势。然而关于miRNA在胰腺癌化疗耐药性的分子机制，研究较为少见。因此，我们的研究从鉴定胰腺癌耐药相关的miRNAs出发，发现miR-320a在胰腺癌细胞系耐药株（PATU8988/5-FU）中显著上调，过表达miR-320a能够促进胰腺癌进展，同时伴随EMT转化的发生，从而促进了胰腺癌细胞耐药性的进一步发展。初步的临床数据分析显示，miR-320a的表达水平与胰腺癌患者化疗后的生存期呈负相关关系。因此，本课题将深入研究miR-320a在胰腺癌5-FU耐药过程中的作用及具体分子机制，找出miR-320a的潜在靶点，发展以此靶点为胰腺癌化疗预后标志物的新治疗方案，指导化疗药物的选择，以改善胰腺癌5-FU化疗耐药的现状。　　目的：　　1、确定miR-320a在胰腺癌细胞5-FU耐药中的重要作用。　　2、阐明miR-320a促进胰腺癌细胞5-FU耐药性的分子机制。　　3、为胰腺癌治疗提供潜在的治疗靶点。　　4、改善胰腺癌5-FU化疗耐药的现状。　　方法：　　1、构建5-FU耐药株，通过miRNA表达芯片和RT-PCR鉴定了一些显著差异表达的miRNAs分子。　　2、使用细胞计数法和CCK8法检测药物半数抑制浓度（IC50）及细胞增殖活性，绘制细胞生长曲线。运用划痕实验和Transwell实验检测miR-320a对胰腺癌细胞的迁移和侵袭能力的影响。　　3、结合靶基因预测软件及靶基因的功能信息分析，选择出若干候选基因。运用双荧光报告基因实验和Western Blot验证相应靶基因的表达水平。　　4、相关临床数据选自TCGA/GEO数据库，Mantel-Cox秩和检验分析miR-320a在胰腺癌患者及正常人群中的表达水平，Kaplan-Meier分析胰腺癌患着的化疗后生存率。　　结果：　　1、成功建立了胰腺癌细胞系5-FU耐药株（PATU8988/5-FU），并鉴定了耐药株（PATU8988/5-FU）与亲本株（PATU8988）之间差异表达的miRNAs，发现miR-320a在PATU8988/5-FU中明显上调。初步的临床数据分析显示miR-320a的表达水平与胰腺癌患者化疗后的生存期呈负相关关系。　　2、在胰腺癌细胞系（PATU8988，PANC-1）中过表达miR-320a能够明显增加胰腺癌细胞对5-FU/Gemcitabine的耐药性，引发胰腺癌细胞的EMT转化，促进胰腺癌细胞系的增殖、迁移和侵袭能力。　　3、软件预测显示PDCD4是miR-320a的直接靶点，在胰腺癌细胞系PANC-1和PATU8988中过表达miR-320a会导致PDCD4的蛋白水平的下降。　　4、过表达PDCD4能够扭转由过表达miR-320a引起的胰腺癌细胞系（PATU8988，PANC-1）的增殖能力和5-FU/Gemcitabine的耐药性。　　结论：　　1、miR-320a在胰腺癌患者中高表达，且与胰腺癌患者化疗后生存率呈负相关。　　2、过表达miR-320a能够促进胰腺癌细胞系的5-FU/Gemcitabine耐药性；　　3、过表达miR-320a能够促进胰腺癌细胞系的增殖，迁移，侵袭及EMT转化能力。　　4、miR-320a通过靶向PDCD4促进胰腺癌的5-FU/Gemcitabine耐药性。