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大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)能够消化利用箭竹（Fargesia）中纤维素类物质，但目前尚未在大熊猫基因组中发现编码纤维素酶的相关基因，可见大熊猫消化纤维素是依赖其肠道中微生物的作用。本研究旨在从大熊猫粪便中分离筛选出产纤维素酶的芽孢杆菌菌株，为纤维素的发酵利用提供菌种资源。 本文首先从大熊猫粪便中分离出具有纤维素降解活性的菌株126株，利用平板扩散法从中筛选出76株可使刚果红平板产生明显透明圈的菌株。通过纤维素酶酶活测定，得到8株酶活较高的菌株(CMC酶活力均高于45.00U/mL)，分别为2N-12、2N-14、Y-6、Y-10、2N-10、3X-10、2L-24、2L-9。 通过16S rDNA序列分析，结合菌株的形态特征和生理生化试验结果，初步鉴定菌株2N-12为阿萨尔基芽孢杆菌（Bacillus axarquienis），2N-14为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis），Y-6、Y-10为西姆芽孢杆菌(Bacillus siamensis)，2N-10、3X-10、2L-24、2L-9为甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)。 在不同生长条件下对B.axarquienis2N-12、B.subtilis2N-14、B.siamensis Y-10、B.methylotrophicus3X-10进行了生长特性及对肠道病原菌的拮抗活性测定，结果显示，菌株2N-14、Y-10、3X-10均可在pH4.0～7.0的条件下良好生长、且耐胆酸盐，并对肠道病原菌有较强的抑制作用。 通过单因素试验确定了3菌株摇瓶培养条件下的碳源、氮源、无机盐种类，由Plackett-Burman筛选确定主要影响因素，结合响应面分析对菌株产芽孢发酵条件进行优化。优化后2N-14菌株的芽孢产量为3.18×109CFU·mL-1，比优化前的5.39×108CFU·mL-1增加4.90倍;Y-10菌株的芽孢产量为2.52×109CFU·mL-1，比优化前的8.08×108CFU·mL-1增加2.12倍;3X-10菌株的芽孢产量为3.22×109CFU·mL-1，比优化前的8.07×108CFU·mL-1增加2.99倍。 在含水量55～65％的玉米秸秆中添加上述菌剂1.0×109CFU·kg-1秸秆，厌氧发酵45d，开窖后对发酵秸秆进行了感观评价及理化指标检测分析。结果显示，各试验组和青贮对照组感官评价均为优等;与青贮对照组相比，3个添加不同菌剂试验组的理化检测指标结果差异显著。其中添加3X-10菌剂的试验组发酵效果最优，发酵秸秆的pH为3.79;乳酸、乙酸含量分别为2.74％、0.65％，比对照组提高了21.78％(P＜0.05)、29.31％(P＜0.05);氨氮/总氮为0.0643，比对照组降低了54.53％(P＜0.05);粗蛋白含量为6.93％，比对照组提高了10.17％(P＜0.05);粗纤维、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、酸性洗涤木质素的含量分别为27.47％、47.87％、30.07％、2.07％，与青贮对照组相比分别降低了29.65％(P＜0.05)、20.15％(P＜0.05)、18.97％(P＜0.05)、17.86％(P＜0.05)。 对发酵秸秆的有氧稳定性进行了评价。结果显示，青贮对照组在第8d高于外界温度2.15℃，pH3.85，开始呈现不稳定状态，而添加3X-10菌剂的试验组在第12d时仍无明显升温现象，pH值为3.86;氨氮/总氮低于青贮对照组。各项指标测定结果均显示添加3X-10菌剂可显著提高发酵秸秆的有氧稳定性。