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目的:肾细胞癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤,尽管肾癌治疗取得了重大进展,但预后仍然较差,死亡率仍然很高。因此,迫切需要研究肾癌细胞增殖和转移的分子机制,为肾癌的治疗提供新的方法。课题组前期研究表明与正常肾组织相比较,VDR表达在肾癌中明显降低,进一步分析还发现TPRV5和VDR的表达水平相关,提示TRPV5可能受VDR的调控参与肾细胞癌的发生和发展,然而,VDR是否调控TRPV5表达,及其在肾癌生物学行为中的作及调控机制并不明确,本研究的目的为揭示VDR是否可调控TRPV5转录表达从而影响肾细胞癌增殖和转移。方法:western blot和RT-PCR检测正常肾细胞癌细胞株caki-1和786-O细胞中VDR蛋白的表达情况;用慢病毒构建VDR过表达和敲除的caki-1和786-O细胞模型,分别用RT-PCR和western blot检测过表达和敲除VDR基因的caki-1和786-O细胞的VDR的mRNA和蛋白水平变化;分别用MTT法、流式细胞术、Transwell小室实验检测过表达和敲除VDR后,caki-1和786-O细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭情况;转录组测序方法检测过表达和敲除VDR后caki-1细胞的差异表达基因功能富集/信号通路分析情况;用RT-PCR和western blot检测过表达和敲除VDR基因的caki-1细胞的TRPV5的mRNA和蛋白水平变化;用MTT法、Transwell小室实验检测单纯敲除VDR、同时敲除VDR和TRPV5、阴性对照组三组caki-1细胞的增殖、迁移和侵袭情况。结果:VDR在caki-1细胞中的表达量要高于786-O细胞。体外细胞功能实验表过表达VDR能够显著抑制caki-1和786-O细胞的增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡;相反的,敲除VDR能促进以上两种细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制细胞凋亡。转录组测序也表明过表达和敲除VDR的caki-1细胞显著差异表达基因富集在细胞凋亡、增殖、分化和迁移等功能上,另外,差异表达基因显著的富集在TGF-β、Apoptosis、TNF、Wnt等信号通路上。此外,我们发现TRPV5和VDR表达呈负相关,即VDR敲除能够促进TRPV5的表达,VDR过表达则抑制TRPV5的表达。最后,单独敲除VDR、同时敲除VDR和TRPV5、阴性对照组三组caki-1细胞实验表明敲除VDR可以诱导细胞增殖、迁移和侵袭能力增强,但在caki-1细胞敲除VDR的基础上,继续敲除TRPV5后,细胞增殖、迁移和侵袭的能力又被削弱,换言之,敲除TRPV5可以抑制caki-1细胞被VDR敲除所诱导的增殖、迁移和侵袭的能力。结论:VDR在肾细胞癌细胞株中起着一个肿瘤抑制因子的作用,此外,VDR可以通过调控TRPV5的转录表达来抑制肾癌细胞株的增殖和转移。