本文在移动反应界面（Moving Reaction Boundary，MRB）原理的基础上，提出了一种全新的检测总蛋白含量的方法，在微型芯片上通过荧光阻滞信号的获得，测定MRB电泳滴定(MRBET)总的蛋白含量结果。通过连续高交联度的聚丙烯酰胺凝胶(continous highly cross-linked polyacrylamide gel，PAG)固定住目标蛋白，并利用H+和蛋白质上的氨基反应，以此提出MRBET酸滴定蛋白原理，构成整个反应系统。理论上，界面位移的阻滞程度是蛋白含量测定的依据。因而，实验中可以利用相关校准曲线的计算，就可以将未知样品的MRB阻滞信号（RMRB）转换成的样品中总蛋白含量。整个MRBET微型芯片装置包含有30个独立的工作单元，并且每个单元有五条极短的（5mm）独立的分离微通道。仅需要15V的电池电压，就可以同时在150个微通道内进行电泳。包含样品的PAG在紫外光照下发生聚合，将样品固定在独立的微通道里，并且这里首次使用了异硫氰酸荧光素（FITC）作为RMRB的指示剂。和传统的使用大玻璃管装置的MRBET相比，这种新型的微流控芯片 MRBET有着以下优点：低电压（芯片 MRBET需要15V电压，而传统需要200V），低样品消耗（芯片MRBET需要约2μL，传统需要200μL），快速分析检测（芯片MRBET需要约20～60sec，而传统需要15min），极强的灵敏度（芯片MRBET不到0.2μg/mL，而传统约为0.15 mg/mL），高通量（芯片MRBET同时运行150管，而传统约只能运行一管），以及芯片具有集成化和自动化的巨大潜力。　　具体的研究情况如下：　　1、MRBET检测总蛋白含量系统的建立　　基本原理：通过连续高交联度的聚丙烯酰胺凝胶(continous highly cross-linked polyacrylamide gel，PAG)固定住目标蛋白，并利用H+和蛋白质上的氨基反应，以此提出MRBET酸滴定蛋白原理，构成整个反应系统。实验结果表明，界面位移的阻滞程度是蛋白含量测定的依据。因而，利用相关校准曲线的计算，就可以将未知样品的MRB阻滞信号（RMRB）转换成的样品中总蛋白含量。并且在实验中证实了一下几点：（1）蛋白质可以被完全的固定在PAG中。（2）H+和蛋白质的碱性残基或者 OH-和蛋白质的酸性残基都可以反应并且进行蛋白质定量检测。（3）实验中H+基本只和蛋白反应，糖类，三聚氰胺等杂质不干扰。　　2、实验装置的设计　　实验所用微流控阵列芯片装置是用PDMS材料制成，在大小为7.5cm×2.5cm的芯片基板上，利用光蚀刻技术对其进行加工，使其表面整齐均匀的排布30（5×6）个操作单元，每个单元的阴极槽（直径1mm）及阳极槽（直径1mm）间分别有平行的5个分离通道（20um deep×80um width×5mm length）将其彼此连接。　　3、施恩奶粉中蛋白总量的检测　　根据 MRB原理，首次在芯片装置上建立新型可视化的电泳滴定，快速准确的检测施恩婴儿奶粉中蛋白总含量。在这个体系中，MRB由氢离子和已经固定于高交联度的PAG中的蛋白，在电场的作用下相互作用，与此同时，用荧光指示剂FITC标定蛋白，使用CCD荧光显微镜实现对MRB位置的实时在线的显示。利用MRB的移动速率与奶粉中蛋白浓度的函数关系来建立相关标准曲线。实验显示，NPN对MRBET法的影响非常小，且MRBET法比传统方法检测速率快，重复性好。