【摘 要】
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中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)俗称河蟹,一种杂食性甲壳类动物,喜食水草、螺蛳等水生生物。螺蛳(Sinotaia quadrata)在生产上的应用很重要,不仅可以作为净化水质的“天然卫士”,也可作为河蟹的活体饵料。但螺蛳能否满足中华绒螯蟹的营养需求,对中华绒螯蟹生长、基础消化代谢有何影响,与投喂人工配合饲料相比,其优劣势又是如何?本论文以中华绒螯蟹“江海21”良种幼蟹作为试验蟹,
【基金项目】
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上海市中华绒螯蟹现代农业产业技术体系建设项目; 上海市科技兴农重点攻关;
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中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)俗称河蟹,一种杂食性甲壳类动物,喜食水草、螺蛳等水生生物。螺蛳(Sinotaia quadrata)在生产上的应用很重要,不仅可以作为净化水质的“天然卫士”,也可作为河蟹的活体饵料。但螺蛳能否满足中华绒螯蟹的营养需求,对中华绒螯蟹生长、基础消化代谢有何影响,与投喂人工配合饲料相比,其优劣势又是如何?本论文以中华绒螯蟹“江海21”良种幼蟹作为试验蟹,利用河蟹个体养殖系统“蟹龙宫”,经过一个养殖周期后,比较两种饵料投喂(螺蛳和配合饲料)下中华绒螯蟹的生长与蜕壳差异,同时借助非靶向代谢LC-MS技术和微生物多样性研究,分析比较上述两种饵料类型对中华绒螯蟹代谢和肠道菌群的影响,旨在为中华绒螯蟹的绿色养殖和人工选育提供参考。论文主要研究结果如下:1.螺蛳和配合饲料对中华绒螯蟹蜕壳生长的影响为了解螺蛳和配合饲料对中华绒螯蟹蜕壳生长影响,本试验采用个体养殖系统,分析比较中华绒螯蟹在两种不同饵料饲养下(L组:螺蛳组;S组:配合饲料组),其存活率、蜕壳增重率、蜕壳间隔、消化酶活性等差异。结果显示:螺蛳组和配合饲料组的存活率分别为86.67%和93.33%,配合饲料组蜕壳后体质量增重率显著高于螺蛳组(P<0.05),配合饲料组的增重率集中在55-65%,而螺蛳组则多数集中在45-55%;蜕壳间期比螺蛳组缩短了约5 d,并且差异显著(P<0.05);配合饲料组的肝胰腺指数显著高于螺蛳组,而出肉率却显著小于螺蛳组,两组的肥满度均表现为在蜕壳后期最低,在蜕壳前期最高,且均无显著差异(P>0.05),肥满度达到60%左右便启动下一次蜕壳;配合饲料组的胰蛋白酶活性远高于螺蛳组(P<0.01),α-淀粉酶活性显著高于螺蛳组(P<0.05),而脂肪酶活性两者相差不大,无显著性差异(P>0.05)。上述研究结果表明,投喂配合饲料比投喂螺蛳更能满足中华绒螯蟹对营养的需求,其生长性能表现更好。2.螺蛳和配合饲料对中华绒螯蟹代谢的影响投喂配合饲料已成为河蟹养殖的主流趋势,而螺蛳对于中华绒螯蟹的生长发育具有重要作用,但目前有关不同饵料对中华绒螯蟹的生理代谢的影响研究却相当匮乏,因此本文通过液相色谱-质谱技术(LC-MS),对两种饵料饲养下的中华绒螯蟹进行代谢组学分析。结果显示:螺蛳组和配合饲料组共得到362个代谢物,代谢物共注释到33条KEGG通路,主要集中在脂类和氨基酸代谢通路;经PCA和PLS-DA分析,两组存在明显的区别,共筛选到187个差异代谢物;与螺蛳组相比,配合饲料组有132个代谢物上调,55个下调,配合饲料组的上调代谢物主要富集在嘌呤代谢、胆碱代谢和甘油磷脂代谢通路,螺蛳组的上调代谢物主要富集在糖异生/糖酵解、胆碱代谢、逆神经信号和甘油磷脂代谢通路;65%的差异代谢物是脂类(Lipids),剩下主要为碳水化合物(Carbohydrates)、核酸(Nucleic acids)、肽类(Peptides)、维生素和辅酶因子(Vitamins and Cofactors)以及类固醇(Steroids),配合饲料组中的泛酸、胆汁酸和肌肽含量显著高于螺蛳组(P<0.05),而螺蛳组的葡萄糖、左旋肉碱和Heptadecanoyl carnitine含量显著高于饲料组(P<0.05)。本研究结果表明,螺蛳和配合饲料对中华绒螯蟹的代谢存在影响,只投喂螺蛳会使得中华绒螯蟹体内左旋肉碱代谢增多,可能会抑制其体质量增加,而只投喂配合饲料会使溶血磷脂酰胆碱增加,可能对机体健康不利。3.螺蛳和配合饲料对中华绒螯蟹肠道微生物的影响生物体的摄食、生存环境、生长阶段、健康状态等均会影响肠道微生物的结构,为了解不同饵料对中华绒螯蟹肠道微生物组成结构影响,本章研究分析了螺蛳和配合饲料饲养条件下中华绒螯蟹肠道菌群组成差异。结果显示:螺蛳组的优势菌群为厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、变形菌门(Proteobacteria),配合饲料组的优势菌群除上述三个外,还存在放线菌门(Actinobacteria);配合饲料组的Chao指数比螺蛳组高,但无显著差异(P>0.05),Shannon指数极显著高于螺蛳组(P<0.01),说明两组的菌群丰富度无显著差异,而配合饲料组的菌群多样性极显著高于螺蛳组;螺蛳组和配合饲料组的肠道菌群组成有明显的差异,菌群结构与中华绒螯蟹蜕壳增重率密切相关。本研究结果表明,螺蛳和配合饲料对中华绒螯蟹菌群差异有较大影响,进而影响中华绒螯蟹的蜕壳生长。
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