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本文着重观察了GM3对EGFR在脂筏内外分布的影响,及对EGFR的酪氨酸残基磷酸化影响情况,进一步揭示GM3抑制EGFR磷酸化的分子机制。
要研究GM3对EGFR在脂筏内外分布的影响,其前期工作就是脂筏的制备与鉴定。通常我们是利用脂筏在低温下不溶于非离子去垢剂这一特性,采用蔗糖密度梯度超速离心对其进行分离。然后将脂筏富含的神经节苷脂GM1作为脂筏的标志分子,采用标记的霍乱毒素-B亚基(choleratoxinBsubunit,CTB)对其进行亲和标记,以确定脂筏在离心后各部分样品中的分布。由于此方法操做复杂,费时,易对环境造成污染。为此,笔者对不同组织细胞的脂筏组分进行了分析研究,创建了一种新的鉴定脂筏的方法。