论文部分内容阅读
栀子Gardenia jasminoides Ellis.为茜草科栀子属植物，其入药部位为果实。栀子黄色素是从栀子果实中提取的一种天然色素，是自然界罕见的水溶性胡萝卜素天然色素。栀子黄色素安全无毒，有利胆、增强肝脏解毒功能，在食品加工、饮料制造、饲料加工及医药研发等方面被广泛应用(辛莎等，2010)。 广藿香Pogostemon cablin(Blanco)Benth.为唇形科刺蕊草属植物，多年生草本，以干燥地上部分入药，是广东地道药材“十大广药”之一。广藿香是“藿香正气水”及多种中成药的重要组成药物。广藿香的有效成分是挥发油。挥发油常被应用在化妆品、定香剂和杀虫剂中。 1.栀子的研究 本实验以栀子野外叶片为外植体诱导愈伤组织；对愈伤组织的生长特点进行研究并绘制生长曲线。结果表明，愈伤组织的最佳收获期为30 d。 以野外叶和茎为材料进行愈伤组织的诱导，并比较不同来源外植体愈伤组织的诱导情况。配方MS+BA1 mg·L-1+NAA1 mg·L-1和MS+KT1 mg·L-1+NAA1 mg·L-1是较好的配方；以腋芽和茎尖诱导丛生芽，配方MS+BA1 mg·L-1+NAAl mg·L-1可以获得芽20个·块-1。 本实验采用超声波提取法从栀子叶片愈伤组织及栀子果实中提取得到栀子黄色素粗提物粉末。以栀子野外叶为外植体，比较不同培养代数以及不同因素对愈伤组织生长量和黄色素累积量的影响。结果如下： 愈伤生长量较高的配方分别是MS+BA1 mg·L-1+NAA1 mg·L-1、MS+BA1mg·L-1+IBA1 mg·L-1和MS+KT1 mg·L-1+IBA2 mg·L-1。对配方MS+BA1 mg·L-1+NAA1 mg·L-1，愈伤组织培养中栀子黄色素累积量较高的是第3-4代；对配方MS+KT1 mg·L-1+NAA1 mg·L-1，愈伤组织中栀子黄色素的积累量较高的是第4-5代；较为适合的接种量是2.0-3.0 g·瓶-1。获得较多且较高纯度黄色素的较好配方是MS+BA1mg·L-1+NAA1 mg·L-1、MS+BA1 mg·L-1+IBA2 mg·L-1和MS+KT1 mg·L-1+IBA2mg·L-1；栀子黄色素在果实中的含量是叶片愈伤组织中的21倍。 2.广藿香的研究 以广藿香野外叶为材料，研究固体培养及悬浮培养条件下愈伤组织诱导情况，并通根据愈伤组织的生长特点分别绘制固体和悬浮培养愈伤组织的生长曲线。得出结果：固体培养和悬浮培养的最佳培养周期都是21 d。愈伤组织的生长曲线呈现出“S”型曲线。 本实验采用超声波提取法从愈伤组织及野外植株中提取挥发油，提取得到挥发油粗提物为淡黄色透明油状物，具有特殊浓郁香味。 以广藿香野外茎、叶及无菌苗茎、叶为外植体进行愈伤组织诱导，比较不同来源外植体对愈伤组织生长量和挥发油累积量的影响。结果如下： 对野外叶和无菌叶愈伤组织，悬浮培养的挥发油含量和总挥发油量明显优于固体培养。对野外叶固体培养，配方MS+BA1 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1和MS+KT1mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1其挥发油含量和总挥发油量最高；对野外叶悬浮培养，配方MS+BA2 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1和MS+KT2 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1其挥发油含量和总挥发油量最高。对无菌叶，较好的固体和悬浮培养配方是MS+BA2 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1和MS+KT2 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1其挥发油含量和总挥发油量最高。 对广藿香野外茎和无菌茎的愈伤固体培养，配方MS+BA2 mg·L-1+NAA0.5mg·L-1和MS+KT2 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1其挥发油含量和总挥发油量最高。 研究不同代数和不同因素对广藿香野外叶愈伤组织生长量和挥发油累积量的影响。结果如下： 第4-5代愈伤生长量和挥发油累积量较高，在第5代末收获愈伤最合适；愈伤生长量及挥发油累积较高的配方是MS+BA1 mg·L-1+IBA0.5 mg·L-1；添加60 g·L-1蔗糖和15 g·L-1蔗糖+15 g·L-1葡萄糖的两个配方，其愈伤的总挥发油量较高；添加泛酸钙和乙酸铵对愈伤组织总挥发油的积累不利。正常光照条件对愈伤组织挥发油的累积有促进作用。广藿香挥发油含量由高到低的顺序为：野外植株叶>野外植株茎>野外叶愈伤组织>无菌叶愈伤组织>野外茎愈伤组织>无菌茎愈伤组织。