[背景] 热疗已经成为了继手术，放疗，化疗和生物治疗之后又一重要的肿瘤治疗手段。全身热疗(WBH)的治疗机制目前还不完全清楚，但其治疗效果已经被假设归因于免疫系统的激活。机体免疫状态的激活对消灭肿瘤起着重要作用，恶性肿瘤患者处于免疫功能抑制状态，而细胞免疫功能紊乱占主要地位。研究表明热疗效果不仅在于高热直接杀死肿瘤细胞，热疗过程机体免疫系统也会发生明显改变，适当温度的WBH可增强机体抗肿瘤的免疫功能，促进白细胞介素2的生成，并使肿瘤局部淋巴细胞浸润增加。为了观察41.8℃全身热疗对非小细胞肺癌患者细胞免疫功能的影响，我们对比了热化疗与化疗两组患者治疗前后各时间点淋巴细胞亚群及血清白细胞介素2(interleukin 2，IL-2)、白细胞介素2受体(interleukin-2 receptor，IL-2R)水平的变化，从而为热疗的治疗机制和临床应用提供理论与实验依据。 [目的] 观察41.8℃全身热疗对非小细胞肺癌患者细胞免疫功能的影响。 [材料和方法] 一、研究对象与分组 研究对象来自广州医学院附属肿瘤医院2003年7月～2004年7月间的住院病人，选取51例经病理确诊且经过一线治疗无效或复发的ⅢB、Ⅳ期非小细胞肺癌患者，随机分为热化疗组和化疗组。其中热化疗组25例，男性16人，女性9人，包括腺癌10例，鳞癌13例，腺鳞癌1例，细支气管肺泡癌1例，此组病人均接受41.8℃全身热疗1次，热疗中同时予化疗(化疗方案多西紫杉醇或多西紫杉醇+顺铂1周期)。化疗组26例，男性18人，女性8人，包括腺癌12例，鳞癌14例，只予单纯化疗(化疗方案多西紫杉醇或多西紫杉醇+顺铂1周期)。 二、热疗过程及采血时间 全身热疗过程大约6小时，包括4小时加热期，60～90分钟41.8℃的平台期，30～60分钟的降温期。分别于热疗前或化疗前(pre)、热疗平台期末或化疗中(mid)、热疗或化疗结束时(end)、热疗后24小时或化疗后24小时(24h)、热疗后48小时或化疗后48小时(48h)抽取患者外周静脉血3ml，其中1ml置肝素抗凝管即送流式细胞术检测，2ml置干燥管即行血清提取后-70℃保存备用。 三、流式细胞术行淋巴细胞亚群分析 用直接免疫荧光技术测定样本淋巴细胞各亚群细胞百分率，经流式细胞仪分析结果。将经肝素抗凝的外周静脉血混匀后，加入各种小鼠抗人单克隆抗体：FITC-CD3/PE-CD16，56、FITC-CD4/PE-CD8双标记单抗和FITC-CD19单标记单抗，置室温暗处反应20分钟后再加入红细胞溶解剂，充分混匀，室温暗处反应30分钟后上机。经流式细胞计数仪分析CD3<+>(全T细胞)、CD4<+>CD8<->(辅助T细胞，T<,h>细胞)、cD4<->CD8<+>(抑制T细胞，T<,s>细胞)、CD16<+>56<+>(自然杀伤细胞，NK细胞)和cD19<+>(全B细胞)细胞百分率。 四、酶联免疫吸附试验双抗体夹心法测定血清IL-2、sIL-2R含量 采用ELISA双抗体夹心法测定，严格按照试剂盒说明操作，结果由标准曲线查出。 五、观察两组患者的近期疗效、化疗毒副作用及全身热疗相关的不良事件. 六、统计方法 实验数据以x±s表示，所有数据均采用SPSS10.0统计软件分析，统计方法为ANOVA。P<0.05为有统计学差异，P<0.01为有显著统计学差异。 [结果] 一、各时间点淋巴细胞亚群的变化 1、T淋巴细胞亚群的变化热化疗组病人在热疗期间T淋巴细胞含量包括T<,h>细胞和Ts细胞持续下降，从起始64.7﹪下降至热疗结束时最低值51.2﹪，较热疗前差异有显著性(P<0.01)，热疗后24小时全面恢复接近起始水平，其后的24小时又显著下降，其中T<,h>细胞与T<,s>细胞的变化趋势相类似，但T<,h>/T<,s>比值在热疗期间持续上升，至热疗结束时达到高峰1.7，热疗后48小时内逐渐下降至起始水平；化疗组病人在化疗期间T<,h>细胞和T<,s>细胞含量均有下降，T<,h>细胞在化疗后逐渐上升，至化疗后48小时已高于起始水平，而Ts细胞在各时间点均稍低于起始值，T<,h>/T<,r>比值只是在化疗中小升至1.53，无统计学差异(P>0.05)。 2、NK细胞的变化热疗作用使热化疗组病人的NK细胞含量由起始的18﹪陡升至54﹪，显著高于其他时间点(P<0.01)，并随着体温的下降而恢复至起始水平，热疗后仍有缓慢上升；化疗组病人NK细胞含量变化不大，在各时间点没有显著性差异(P>0.05)。 3、B细胞的变化两组病人的B细胞含量受热化疗或化疗的影响不大，在各时间点没有显著性差异(P>0.05)。 二、各时间点血清IL-2、sIL-2R的变化 1、血清IL-2的变化 热疗作用使热化疗组病人血清中IL-2浓度由起始的7.1 pg/ml上升至21.8 pg/ml较热疗前显著升高(P<0.01)，在热化疗后48小时依然保持16 pg/ml的浓度，也显著高于热疗前(P<0.01)；而化疗组病人血清IL-2浓度则持续下降，由化疗前的9.2pg/ml降到化疗后48小时的2.5 pg/ml。 2、sIL-2R的变化 sIL-2R的浓度在热化疗作用下与IL-2的变化相反，由热疗前的2113.3 pg/ml显著下降至热疗中1506.5 pg/ml(P<0.01)，并随着温度的下降逐渐上升，直至热疗后48小时达到2971.4 pg/ml的高峰。而化疗组病人在化疗中明显上升至2578 pg/ml，显著高于化疗前(P<0.01)。 [结论] 1、41.8℃全身热疗在本研究中发挥的是短期而显著的效应； 2、41.8℃全身热疗能够促使T淋巴细胞重新分布，使CD4<+>/CD8<+>比值回升； 3、本研究显示41.8℃全身热疗对B淋巴细胞影响不大； 4、本研究中，全身热疗联合化疗和单纯化疗比较，非小细胞肺癌患者免疫功能状态的变化趋势有明显差异。