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【目的】TRAIL是肿瘤坏死因子超家族成员之一,能诱导大多数肿瘤细胞凋亡而对正常细胞无毒性。Caspase-8是起关键作用的凋亡分子,其启动子区5’CpG岛甲基化后不仅使基因沉寂,而且会增加基因的缺失率和突变率。研究表明,某些肿瘤细胞对TRAIL耐药与caspase-8表达下调有关,而caspase-8表达下调又与caspase-8基因甲基化有关。5-Aza-CdR能与DNA甲基化转移酶结合,逆转甲基化状态,推测可能恢复肿瘤细胞对TRAIL的敏感性。目前胃癌细胞caspase-8基因甲基化状态对TRAIL抗癌作用的影响少有研究,对此进行研究对阐明TRAIL的抗癌机制及对胃癌患者的治疗均有重要意义。为此我们对胃癌细胞caspase-8基因甲基化状态对TRAIL抗癌作用的影响进行了实验观察,并探讨了5-Aza-CdR在胃癌治疗中的作用。 【方法】采用Ni2+亲和层析法纯化TRAIL蛋白;采用甲基化特异PCR(MSP)检测caspase-8基因甲基化状态;采用RT-PCR方法检测5-Aza-CdR诱导的caspase-8 mRNA的表达;采用MTT法观察TRAIL的抗癌活性。 【结果】MTT结果显示应用200ng/ml TRAIL作用24小时对SGc 7901、Kato 3和AGS胃癌细胞生长的抑制率分别为11.29%、11.70%和2.026%,提示3种胃癌细胞对TRAIL均有不同程度的耐药性;对3种胃癌细胞株的Caspase-8基因甲基化状态进行检测,结果3种胃癌细胞株caspase-8基因均为非甲基化状态;Caspase-8 mRNA均有表达,但表达较低;用5-Aza-CdR处理后,胃癌细胞caspase-8 mRNA表达量明显增加,且可提高细胞细胞对TRAIL的敏感性。 【结论】胃癌细胞对TRAIL耐药与caspase-8的表达下调有关,5-Aza-CdR能增强caspase-8的表达,恢复胃癌细胞对TRAIL的敏感性。