研究背景及目的干细胞治疗可以用于修复和再生受损的心肌组织,然而移植细胞存活率低下限制其治疗效应。外泌体通过介导细胞存活和细胞间的相互联系调控多种细胞生物学过程。Rab27a,属于GTPases家族成员,在外泌体释放过程起重要作用。本实验拟探究心梗后恶劣环境中受损心肌细胞来源的外泌体是否加重移植的骨髓间充质干细胞凋亡损伤。研究方法本研究通过体外实验H2O2刺激细胞模拟心梗后局部环境中氧化应激损伤,将氧化应激心肌细胞条件培养基和其中的外泌体在氧化应激下培养BMSCs,探究心肌细胞是否能通过旁分泌和旁分泌中的外泌体影响BMSCs凋亡。运用TALEN基因编辑技术构建Rab27a基因敲除小鼠并验证基因敲除小鼠心肌细胞中外泌体释放能力是否下降。体内实验构建雌性小鼠心梗模型并植入GFP标记的雄性小鼠BMSCs到心肌梗死区域边缘,运用荧光定量PCR（Real-Time PCR）测定GFP和SRY的基因表达和共聚焦激光显微镜观察GFP荧光信号来分析心肌细胞外泌体是否对移植的BMSCs活性有影响。结果体外实验结果发现,随着细胞活性下降,流式凋亡比例升高,蛋白cleaved caspase-3/caspase-3比值升高及Bcl-2/Bax比值下降,心肌细胞条件培养基及其外泌体能加重H2O2诱导的BMSCs凋亡,此外外泌体在其中起关键作用。体内实验结果发现,在细胞移植治疗后第1天和第4天,KO组Sry DNA和GFP mRNA含量及GFP荧光信号强度均明显较WT组高,进而说明心肌细胞外泌体会加重心梗后移植治疗的BMSCs损伤。结论1心肌细胞条件培养基能促进H2O2诱导的BMSCs凋亡。2心肌细胞氧化应激条件培养基中的外泌体加重BMSCs凋亡并在其中起关键作用。3心梗后恶劣环境中受损心肌细胞来源的外泌体加重移植的BMSCs凋亡损伤。而阻断心肌细胞外泌体或其有害内容物的释放可能是一个增加心梗后移植细胞存活的有效策略。