论文部分内容阅读
目的:观察β-榄香烯对四氯化碳肝纤维化大鼠TGF-β1、α-SMA、Col-Ⅰ、MMP-2、MMP-9mRNA表达的影响,从而探讨β榄香烯抗肝纤维化的作用机制.方法:采用CCl4皮下注射诱导Wistar雄性大鼠肝纤维化模型,用β-榄香烯0.1ml/100g剂量每天腹腔注射8周后,用苏木精-伊红染色和胶原纤维(Masson)染色观察大鼠肝脏病理变化,酶动力法检测肝功能,SP免疫组化法检测肝组织中α-肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1 (TGF-β1 )、Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)表达的变化,样本碱水解法检测肝组织中羟脯氨酸(HYP)的含量.应用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)测定大鼠肝组织中MMP-2、MMP-9mRNA表达量的积分光密度比值(V/B),以V/B值反映各组织中MMP-2、MMP-9 mRNA表达量的高低.结果:在治疗给药8周后,正常组、模型组、对照组、治疗组肝组织胶原纤维面积百分比分别为1.22±0.24、7.47±0.81、5.57±0.78、4.33±0.48,治疗组vs模型组(P<0.01),治疗组vs对照组(P<0.01),肝组织纤维化程度分级较模型组逐渐好转,胶原纤维所占面积显著缩小;模型组和治疗组酶学指标ALT、AST、ALB分别为254.88±70.18 vs 208.47±85.70;414.42±138.11 vs 330.92±107.40;26.54±1.59 vs 28.47±1.11, P<0.05;肝组织中测得的羟脯氨酸OD比值分别为0.162±0.048、0.410±0.145、0.273±0.088、0.186±0.120,治疗组vs模型组(P<0.01); I型胶原阳性面积比分别为3.022±0.553、9.998±1.431、7.554±0.914、4.587±1.008,治疗组vs模型组(P<0.01),治疗组vs对照组(P<0.01);α-SMA在肝组织中的表达分别为0.968±0.281、5.605±1.315、4.914±0.893、3.172±0.542,治疗组vs模型组(P<0.01); TGF-β1在肝组织中的表达分别为1.026±0.208、5.653±0.9、4.702±0.627、2.868±0.554,治疗组vs模型组(P<0.01),治疗组vs对照组(P<0.05).RT-PCR测得的各组肝组织中MMP-2mRNA积分光密度比值分别为(1.0124±0.1257、1.9353±0.1447、1.5885±0.2963、1.3205±0.3875,模型组vs正常组P<0.01 ;模型组vs治疗组P<0.05 ); MMP-9mRNA积分光密度比值分别为(0.1684±0.0745、0.5137±0.0918、0.3833±0.1605、0.3178±0.1204,模型组vs正常组P<0.01;模型组vs治疗组P<0.05).结论:β-榄香烯对四氯化碳肝纤维化大鼠具有拮抗作用,能通过降低肝纤维化进程中TGF-β1、α-SMA、COL-I、MMP-2和MMP-9mRNA的表达来抑制肝星状细胞激活,降解沉积的细胞外基质(ECM),从而逆转纤维化的形成.