禽流感（AI）是由A型流感病毒引起禽类（家禽和野禽）的感染或疾病综合征。世界上许多国家和地区都曾爆发过此病,给养禽业造成巨大的损失。同时,其对人类的公共卫生也造成了相当大的威胁。因此,研究AI意义重大。 本研究将禽流感病毒（AIV）H5亚型分离株A/Chicken/Guangdong SZ/1/00（H5N1）（SZ）,接种9～11日龄SPF鸡胚,收集死亡鸡胚,经适当处理后免疫6～8周龄BALB/c小鼠。应用淋巴细胞杂交瘤技术,经细胞融合后通过血凝抑制试验（HI）进行筛选,得到2株稳定分泌抗AIV H5亚型血凝素蛋白的杂交瘤细胞株,分别命名为1E5,4A4。经鉴定,其免疫球蛋白亚型均为IgG1、Kappa链;细胞培养上清HI效价为2⁶～2⁸,腹水HI效价达2¹⁰～2¹⁶。此2株单克隆抗体（McAb）能与AIV H5亚型标准毒株及20株H5亚型国内分离株反应;而与2株H7亚型、15株H9亚型分离株以及AIV H1～H4、H6～H15亚型标准毒株均不反应;与新城疫病毒（NDV）、鸡产蛋下降综合征病毒（EDSV）无交叉反应。4A4杂交瘤细胞株McAb免疫印迹（Western-blot）结果显示,该单抗是针对AIV H5亚型血凝素蛋白的特异性McAb。 利用获得的抗AIV H5亚型血凝素McAb,通过生物素——亲和素放大系统建立了单抗——生物素捕获ELISA检测方法。结果表明,该方法特异性强,能够检出H5N3标准毒株和所有20株国内AIV H5亚型分离株,与其它14株AIV血凝素亚型的标准毒、2株AIV H7亚型和15株AIV H9亚型分离株及NDV、传染性法氏囊病毒（IBDV）和EDSV均无交叉反应。该方法对于快速检测H5亚型的AIV具有良好的应用前景。