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精子具有主动结合、转运、整合外源DNA的能力,并在受精时导入卵母细胞,获得转基因动物。精子介导基因转移（Sperm-mediated gene transfer, SMGT）是目前获得转基因动物简单而高效的方法之一。精子与外源DNA的整合是受到严格调控的一种现象,SMGT方法存在着极大的随机性和不确定性。SMGT方法主要是由外源DNA、精子、转染方法等构成的一个有机整体。但目前研究集中在外源DNA因素,如DNA浓度、片段大小、序列、结构、载体类型等对SMGT方法的影响。SMGT方法离不开精子。精液来源、精液品质、精浆、精子质膜和精液处理方法等构成了SMGT方法的精子因素。但这些精子因素对SMGT方法的影响如何,目前研究还不系统。从这些精子因素出发,筛选精子供体、优化精液处理方法,对提高精子转染外源DNA效率,建立稳定、高效的SMGT方法,提高生产转基因动物效率,也是十分重要的。本文从精子因素出发,研究其对精子载体法生产转基因动物效率的影响,共分为3部分。第一部分研究不同品种、不同年龄山羊的精子转染外源DNA的效率,筛选转染效率高的品种和精子供体。第二部分研究精液冷冻处理对山羊精子转染内化外源DNA效率的影响,并建立一种保证精液品质和稳定、高效的SMGT方法;第三部分用筛选的精子供体和优化的转染处理方法,将转入外源基因的精子进行人工授精生产转基因山羊,研究精子因素对生产转基因动物效率及对SMGT方法稳定性的影响。在第一部分实验中,比较不同品种、不同年龄山羊的精子转染外源DNA的效率,筛选转染效率高的品种和精子供体。选择2岁川东白山羊、波南F1山羊、波尔山羊和南江黄羊公羊共55只,14岁川东白山羊和波南F1山羊共137只,采集公羊精液,分析精液品质,用通过正交试验设计L16（44）建立的山羊精子和外源DNA处理方法转染,地高锌标记的原位杂交（in situ hybridization）检测方法,比较这些山羊的精子转染效率。结果表明:不同品种、年龄山羊的精子转染外源DNA的效率不同,其中1岁的川东白山羊转染效率最高。首先,不同品种山羊的精子转染内化外源DNA效率不同。其中转染效率较高的是川东白山羊和南江黄羊,最低的是波尔山羊,中等的是波南F1山羊。2岁南江黄羊和川东白山羊的精子转染效率分别为（38.48±17.54）%和（34.62±20.76）%,差异不显著（P>0.05）;波尔山羊的为（13.85±8.50）%,与南江黄羊和川东白山羊相比差异极显著（P<0.01）。同样,不同年龄山羊的精子转染内化外源DNA效率不同。川东白山羊精子结合外源DNA的能力随着年龄的增大而有减少的趋势。川