大菱鲆早期发育及其相关生理特性研究

来源 :中国科学院研究生院(海洋研究所) | 被引量 : 15次 | 上传用户:binaryaa
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大菱鲆Scophthalmus maximus自然分布于东北大西洋沿岸,具有生长快、肉质优良等特点,目前已成为我国北方重要的海水养殖种类,其工厂化繁育和养殖技术的建立,有效推动了我国海水鱼类养殖产业的发展。鱼类早期阶段的发育规律,是解释其生活史发生机理途径的重要基础,也是提高实践生产中鱼苗培育技术的重要理论依据。因此,本文借助于生理学、组织学和生物化学的方法,研究了大菱鲆早期发育过程中的胚胎发育特性、生长特性、消化生理和免疫特性及骨骼发生发育规律。结果如下:1.大菱鲆胚胎发育主要经历6个时期;在14°C时,胚体经108h即可孵化出膜。胚胎在多细胞期时形成卵黄合胞体层,在低囊胚期时形成囊胚腔。胚盘下包90%时,神经索和体节形成;胚盘下包完全时,脊索原基形成。在受精后59h35min,克氏囊出现;89 h时,克氏囊退化消失。孵化前,大菱鲆胚胎消化管的后端出现纤毛。初孵仔鱼鳍褶上形成特有的色素丛。2.大菱鲆消化系统的发育分为四个阶段。从孵化到仔鱼开口之前,消化道逐渐延长;4日龄时仔鱼开始摄食外源饵料,此时其消化道逐步分化为口咽腔、食管、胃、前中肠和后肠,具备了独立进行外源性摄食的能力。4日龄到16日龄,嗜伊红颗粒和核上空泡状结构出现在消化道中,显示了细胞内消化的开始;消化道粘膜皱褶数量逐步增加,肝脏和胰脏进一步发育。16日龄到35日龄,该阶段16日龄时胃腺出现,胃的功能逐渐完善;20日龄时幽门盲囊形成;肠道粘膜皱褶和纹状缘的丰度以及粘液细胞的数量都快速增加。在60日龄时,消化系统基本发育完成。3.大菱鲆免疫器官原基出现的先后顺序是头肾、脾脏和胸腺。初孵仔鱼,肾为一对简单的直肾管,出现未分化的干细胞。5日龄时,脾脏原基出现,其淋巴化速度较慢。13日龄时,胸腺原基出现,发育速度较快,分为外区和内区。在胸腺和头肾之间出现细胞迁移现象。免疫器官淋巴化的顺序是胸腺、头肾和脾脏。在免疫器官发育后期,脾脏和头肾中均发现了黑色素-巨噬细胞中心(MMCs),脾脏中较丰富,但在胸腺中尚未发现。4.消化酶发育变化表明:卵及胚胎中均未检测到淀粉酶的活性;碱性磷酸酶(AP)、胰蛋白酶、胃蛋白酶和亮氨酸-丙氨酸肽酶(Leu-ala)在胚胎发育早期和后期活性较高,中期较低,但胃蛋白酶活性在孵化时基本消失;亮氨酸氨基肽酶(LAP)在胚胎发育阶段规律不明显。胰蛋白酶在17日龄时达到最高值,然后急剧下降至31日龄并一直保持较低的活性。淀粉酶在4日龄时出现,39日龄之后活性较低。胃蛋白酶在17日龄时出现,在34日龄时快速升高至稳定的活性水平,表明了消化机制的转变。AP和LAP活性在23日龄前呈上升趋势,然后急剧下降至50日龄,之后逐渐增高。Leu-ala在23日龄前活性较低,23-39日龄时活性较高,然后活性下降。刷状缘膜酶的活性占相应酶总活性的比率从31日龄时的30%上升至38日龄时的81%,表明了肠道成熟和消化方式转变的过程。5.大菱鲆仔稚鱼在变态期特定生长率显著增加,在变态后期特定生长率下降。DNA、RNA及总蛋白的变化都带有发育阶段特异性。RNA: DNA比值在12日龄之前呈下降趋势,然后快速增加直至19日龄并在较高的水平上保持波动至35日龄,之后呈下降趋势。在变态后,RNA: DNA比值与生长呈明显正相关;但是在变态前和变态期,RNA: DNA比值并不是评价生长的有效指标。蛋白: DNA比值的变化趋势跟RNA: DNA比值相似。DNA含量和蛋白: DNA比值的变化表明:在变态前,大菱鲆仔鱼4至12日龄的生长以细胞增殖为主,然后以细胞增大为主;在变态早期和变态高峰期,大菱鲆的生长以细胞增大为主;之后以细胞增殖为主。6.骨骼发育结果表明,在5.1 mm体长(LS),脊柱的发生开始于最前端的脉弓;在16.9 mm LS时,椎体横突骨化完全,标志着脊柱的发育完成。在6.3 mm LS ,脊椎骨开始发生;11.0 mm LS时,脊椎骨的骨化全部可见。在5.1 mm LS,尾鳍发育开始;在20.6 mm LS ,尾鳍骨化可见。背鳍及臀鳍分别在5.8 mm LS,6.3 mm LS开始发育;并在20.6 mm LS时,两者的骨化全部可见。在23.5 mm LS时,胸鳍的骨化可见。在7.2 mm LS时,腹鳍开始发育;在19.8 mm LS时,腹鳍骨化可见。本实验中,共发现了24种骨骼畸形类型。在不同的发育期,畸形出现频率最高的分别是背鳍畸形(变态早期),脊椎骨融合(变态高峰期)和尾鳍畸形(变态后期和变态后)。
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