【摘 要】
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该文较系统地研究了AchR特异性Ts细胞及其培养上清在体内外调节作用.首先,通过体外培养MG患者的淋巴细胞,我们观察到经AchR抗原诱导的正常人T细胞可使MG患者T细胞亚群间的比
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该文较系统地研究了AchR特异性Ts细胞及其培养上清在体内外调节作用.首先,通过体外培养MG患者的淋巴细胞,我们观察到经AchR抗原诱导的正常人T细胞可使MG患者T细胞亚群间的比例发生改变,CD<,8><+>细胞数量明显增多,CD<,4><+>/CD<,8><+>比值明显降低,并能降低MG患者淋巴细胞产生AchR-Ab的能力,抑制淋巴细胞的增殖反应,接着我们用AchR诱导的正常人淋巴细胞培养上清进行EAMG小鼠的治疗试验,并于治疗前和治疗后分别用酶联免疫吸附试验(ELISA)和微量细胞毒试验检测小鼠血中AchR-Ab的含量和T细胞亚群的变化,并检测小鼠的肌电图.在体内、外实验取得较理想结果的基础上,我们根据特异性T抑制因子(TsF)能诱导活化Ts细胞的理论,从建立的分泌AchR-TsF的特异性Ts细胞系中直接提取了TsF PolyA<+>mRNA,反转录合成全长cDNA.然后,以脱磷酸化的λgtllEcoRI臂为载体,体外包装成噬菌体颗粒并转染E.coli Y1090hsdR,得到cDNA文库.最后,用TCR-α单克隆抗体膜上免疫印迹法对该文库进行筛选,初步筛到27个阳性重组噬菌体,并提取阳性重组噬菌体的DNA,EcoRI酶切后电泳分析表明插入片段大小约为1kb左右,符合文献报道.
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