肝癌作为消化系统恶性肿瘤之一,严重影响人类的健康。在治疗中,高剂量的化疗药物会导致严重的副作用。因此,开发新型的低副作用药物和寻求有效的治疗方法对肝癌的临床治疗具有重要意义。很多天然来源的小分子化合物具有选择性杀伤癌细胞、缓解耐药性和减轻化疗药物副作用的功能,已被开发为药物或化疗辅助性药物广泛应用于癌症的治疗。地榆皂苷Ⅱ作为地榆中三萜类化合物的主要活性成分,具有止血、止泻、抗肿瘤、抗糖尿病、抗菌和抗氧化等功能,成为潜在的癌症治疗药物。本研究以肝癌细胞为模型,探究地榆皂苷Ⅱ抗肝癌作用的分子机制。1.通过CCK8方法检测细胞增殖,发现了地榆皂苷Ⅱ对四种肝癌细胞（Hep G2,SMMC-7721,Hep3B和Huh7）生长的抑制作用与其剂量和处理时间呈依赖性。然而,在同等条件下,地榆皂苷Ⅱ对正常肝细胞HL-7702的生长抑制作用相对较弱。在流式细胞仪检测中,地榆皂苷Ⅱ诱导肝癌SMMC-7721和Hep G2细胞的凋亡。通过Western blot分析,地榆皂苷Ⅱ处理后的这两种细胞中,与凋亡相关的caspase 3蛋白被激活,PARP蛋白被切割,进一步证实了地榆皂苷Ⅱ能够诱导肝癌细胞凋亡。细胞划痕实验中,地榆皂苷Ⅱ可以有效地抑制SMMC-7721和Hep G2细胞的迁移。2.通过Illumina Hi Seq测序平台对地榆皂苷Ⅱ处理的Hep G2细胞进行转录组测序（RNA-seq）,筛选出463个差异表达基因,其中201和262个基因分别呈现上调和下调表达。在KEGG富集分析中,MAPK信号通路受地榆皂苷Ⅱ影响最为显著。在进一步对该通路中差异表达基因进行分析时,DUSP家族的表达均呈上升趋势,并通过实时定量PCR得到了证实。3.通过对DUSP基因家族成员的功能和RNA-seq数据分析,预测受地榆皂苷Ⅱ调节的核心基因为DUSP6。在肝癌Hep G2和SMMC-7721细胞中利用装载sh RNA的慢病毒敲低肝癌细胞的内源DUSP6表达,再通过CCK8和Western blot实验,发现DUSP6的敲低能够降低Hep G2和SMMC-7721细胞对地榆皂苷Ⅱ生长抑制的敏感性,表明DUSP6是地榆皂苷Ⅱ抑制肝癌细胞增殖及凋亡的一个关键的调控基因。综上所述,本研究揭示了地榆皂苷Ⅱ对肝癌细胞抑制增殖、促进凋亡和抑制迁移的作用,揭示了地榆皂苷Ⅱ对肝癌细胞发挥抑制作用的分子机理。本研究为以后地榆皂苷Ⅱ开发为临床抗癌药物提供了实验和理论依据。