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背景： 随着社会环境、生活方式、饮食习惯的改变，非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）已成为最常见的慢性肝脏疾病之一，其发病机制很复杂，和代谢综合征（MS）密切相关，胰岛素抵抗（IR）是中心环节。遗传和环境因素相互作用可影响NAFLD的发生和发展。肿瘤坏死因子（TNF-α）是单核巨嗜细胞、T淋巴细胞、成纤维细胞分泌的细胞因子，也可在肝细胞、脂肪细胞及某些肿瘤细胞产生，在炎症反应、免疫调节中起重要作用。TNF-α可直接作用于胰岛素信号转导系统，又可诱生其他细胞因子如IL-6等，从而引IR。瘦素（Leptin）由脂肪组织分泌，与其受体结合后调节体内能量平衡、血糖代谢、脂肪储存及某些内分泌功能。瘦素可抑制胰岛素分泌和增加靶组织对胰岛素的敏感性，影响NAFLD的发生和发展。临床研究显示NAFLD患者血浆TNF-α及瘦素水平与对照组比较存在显著性差异，这和两者基因的单核苷酸多态性（SNP）相关，其中TNF-α基因启动子存在多个位点SNP，如G-238A、G-308A、C-857T、C-863T、T-1031C等；瘦素基因SNP位点有G-2548A、C-2549A、A nt+19G等。目前文献可获得的NAFLD与TNF-α或瘦素的相关性研究多是横向研究，且研究的位点也不统一。我们前期的横断面流行病学调查显示，TNF-α基因G-238A位点（而非G-308A位点）G→A变异增加NAFLD发病易感性，A等位基因通过增加患者血浆TNF-α水平而起作用。瘦素G-2548A位点等位基因为G的患者血清瘦素水平明显高于为A的患者，从而改变机体对胰岛素的敏感性和NAFLD发病易感性。 目的： 本研究在前期横断面调查的基础上，进一步纵向追踪这队列人群4年，并扩大研究位点，同时研究TNF-α三个位点（G-238A、G-308A、C-857T）及瘦素G-2548A位点，探讨其SNPs与NAFLD发病易感性及病程进展两者的相关性，从分子水平探讨NAFLD的发病机制。 方法： 在2005年6月至9月（基线）对广东省3543例普通人群进行NAFLD流行病学调查的基础上，2009年6月至9月（终点）我们用同样方法回访这队列人群（中位数4.0年）。除外219人失访，剩余的3324例中有696人愿意接受复查，纳入本研究。对研究对象再次进行问卷调查，内容同前，包括一般情况、健康相关行为（饮酒、吸烟、饮食习惯、运动情况）、疾病史等。测量腰围、臀围、身高、体重、血压等临床参数，并进行血生化检查（肝功能、空腹血糖、血脂、血清胰岛素水平、超敏C-反应蛋白、乙型和丙型肝炎标志物等）和腹部实时B超检查。从外周静脉血中提取DNA，应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）检测 TNF-α三个位点：-238（rs361525）、-308（rs1800629）和-857（rs1799724）及瘦素-2548（rs7799039）的SNPs，用琼脂糖凝胶电泳检测目标片段。数据统计采用数据分析软件（SPSS16.0 for windows）处理，通过χ2检验和有序logistic回归分析研究各位点SNP与NAFLD发病及病程进展的相关性。 结果： 2005年NAFLD标化患病率为21.29％，至2009年显著升高达46.11%（P＜0.05）。NAFLD组和对照组间性别差异不显著（P＞0.05）；年龄、体重指数（BMI）、腰臀比（WHR）、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、甘油三酯（TG）、空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（FPI）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、超敏C-反应蛋白（HS-CRP）等指标在NAFLD组显著高于对照组（P＜0.05）；而总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）在两组间的差异未达显著性（P＞0.05）。NAFLD组MS患病率为37.3%，显著高于对照组8.3%（P＜0.05）。Hardy-Weinberg检验提示TNF-α-238位点各基因频率未达到遗传平衡（P＜0.05），故于剔除，TNF-α-308、TNF-α-857和瘦素-2548位点纳入研究。χ2检验显示，NAFLD组与对照组相比，TNF-α-857和瘦素-2548位点的基因型及等位基因频率差异均达显著性（P＜0.05），NAFLD患者中TNF-α-857等位基因T型者的发病危险比率（RR）是对照组的1.463倍，瘦素-2548等位基因A发病的RR是对照组的1.105倍；而TNF-α-308位点基因型及等位基因频率在两组间无显著差异（P＞0.05）。有序logistic回归分析显示，性别对NAFLD病程进展无显著影响（P＞0.05），年龄影响显著（P＜0.001）；校正性别和年龄后，TNF-α-857位点 T/T基因型和NAFLD病程进展正相关，其危险性比值比率（OR）是C/C型的8.65倍(P＜0.001)，而C/T型与C/C型比较差异未达显著性（P=0.072）；TNF-α-308和瘦素-2548位点各基因型对NAFLD病程进展均无显著性影响（P＞0.05）。 结论： 1.TNF-α-857位点C→T变异（而非TNF-α-308位点）与NAFLD发病易感性及病程进展两者均正相关，T/T型增加疾病发生和进展的风险。 2.瘦素-2548位点G→A变异与NAFLD发病易感性相关，A/A型增加疾病发生的风险，但与其病程进展无显著相关性,提示瘦素-2548基因变异对表性的影响主要在发病初期。