急性操作胁迫对养殖圆口铜鱼头肾免疫功能的影响

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本研究通过在野外条件下人工模拟操作胁迫,应用光镜、电镜对头肾组织结构进行组织学观察,研究了正常和胁迫状态下养殖圆口铜鱼(Coreius guichenoti)头肾的组织结构、细胞结构及数量,以及血液、头肾中酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)和过氧化氢酶(CAT)三种免疫酶的活性,探讨了应激对圆口铜鱼头肾免疫力的影响及圆口铜鱼在操作胁迫后0.1h、4h、24h的变化特征。主要结果如下:1)圆口铜鱼头肾分为左右两侧,位于腹腔膜外的胸腔内咽退缩肌上方两侧,与腹腔内的体肾明显分离。正常圆口铜鱼头肾组织实质中无肾单位,主要由淋巴组织、造血组织、血管、肾间组织及黑色素巨噬细胞组成,各组织及细胞结构形态正常,分布规则。在操作胁迫后0.1h、4h时,头肾中黑色素巨噬细胞数量较正常组显著增多(P<0.01),形成黑色素巨噬细胞中心,同时肾间组织增生,肾间细胞面积、核面积和核直径均有不同程度增大;在操作胁迫后24h时,黑色素巨噬细胞数量和肾间细胞面积、核面积、核直径均减小,并均低于正常组(P<0.01)。2)正常圆口铜鱼头肾中主要有5类细胞:红细胞、淋巴细胞、单核细胞、粒细胞、血栓细胞。操作胁迫后头肾细胞的形态结构和数量都发生变化。在形态结构上,不规则红细胞增多,核环带不清晰,核膜消失,细胞质密度不均匀,有空泡,出现大量溶酶体;淋巴细胞的细胞质中溶酶体数量增多,线粒体数量减少,体积减小,部分线粒体膜不清晰,线粒体嵴断裂变形,内质网中空腔增大;单核细胞核中染色质变少,细胞质中含有细胞碎片,颗粒状物质、空泡增多,内质网分布散乱,线粒体数量减少。I型粒细胞的细胞质中出现空泡,粗面内质网增多,特殊颗粒物分布散乱,部分颗粒物包裹在透明的囊泡中,有消解的趋势;大部分II型粒细胞无核,细胞质颜色不均匀,有空泡,在近中心处出现丝状物,溶酶体显著增多,特殊颗粒变小,各颗粒物间体积差距明显变大,电子密度分布不均;血栓细胞无明显变化。在数量上,红细胞、嗜中性粒细胞数量和嗜碱性粒细胞在0.1h-24h持续减少(P<0.01);淋巴细胞和单核细胞数量在应激后0.1h短暂增多,随后在4h、24h时持续降低;血栓细胞数量在应激后0.1h-24h时持续增加。3)操作胁迫导致圆口铜鱼血液、头肾组织中ACP、AKP和CAT的活性发生变化。血液ACP在操作胁迫后O.1h、4h、24h时的活性均显著低于正常组(P<0.05);头肾ACP活性先在0.1h时短暂升高,然后在4h、24h时下降。血液AKP活性在操作胁迫后0.1h时下降,在4h、24h时升高,各应激组间及应激组与正常组间均无显著差异(P>0.05);头肾AKP活性在应激后在0.1h时迅速升高,在4h、24h时下降。血液CAT活性在应激后0.1h、4h时持续增高,在24h时下降;头肾CAT活性在应激后0.1h时最高,随后在4h、24h时下降。圆口铜鱼血液、头肾中ACP、 CAT活性对应激变化较为灵敏,可以作为反应应激程度的生物指标。
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