胃癌中Smac、MDM2的表达与幽门螺杆菌L型感染的研究

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目的:检测人胃癌组织中Smac和MDM2基因与蛋白的表达,及其二者与临床病理因素之间的关系;分析Smac、MDM2与幽门螺杆菌L型感染之间的关系;探讨三者在胃癌发生发展中的相关性。方法:1、应用免疫组织化学Elivision法检测100例胃癌组织及40例对应切缘组织正常胃黏膜(对照组)中Smac、MDM2蛋白的表达;2、应用免疫组织化学染色Elivision法与革兰染色法检测上述组织中Hp-L型的感染的情况;3、应用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测30例新鲜胃癌组织及远端正常对照胃黏膜组织(>5cm对照组)中Smac、MDM2的mRNA水平。结果:1、Smac的检测结果:1)在胃癌组织及其对照组正常胃黏膜组织中Smac蛋白表达阳性率分别为31%(31/100)、62.5%(25/40);可见Smac蛋白在胃癌组中的表达明显低于癌旁正常胃黏膜组,差异具有统计学意义(P<0.01),且Smac的表达水平与患者的癌组织的分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移有关,而与患者性别和年龄无关(P>0.05);2)RT-PCR结果显示:胃癌组中的Smac mRNA的表达量较对照组正常胃黏膜中的表达量明显降低(P<0.05),且表达水平与胃癌细胞的分化程度、浸润深度以及有无淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者的年龄、性别无关(P>0.05)。2、MDM2的检测结果:1)胃癌组和对照组MDM2蛋白表达阳性率分别71(71/100)、42.5%(17/40),胃癌组中MDM2蛋白的表达明显高于对照组正常胃黏膜,差异有统计学意义(P<0.05)。2)RT-PCR结果显示,胃癌组织中的MDM2mRNA的表达量明显高于其在远端正常对照组织中的表达量(P<0.05),且表达水平与癌细胞的分化程度、肿块的浸润深度及有无淋巴结转移有关(P<0.05),与患者的性别、年龄无关(P>0.05)。3、Hp-L型的检测结果:1)革兰染色:100例胃癌组织中检出Hp-L型阳性率为79.%(79/100),免疫组织化学染色检出Hp-L型阳性检出率为76.0%(76/100),两种方法检测的结果一致(P>0.05);则100例胃癌组织中幽70例Hp-L型感染阳性(定义革兰染色L型检出阳性与免疫组织化学染色检出Hp-L型同时阳性者),其阳性率为70.0%。2)对照组中有19例革兰染色检出Hp-L型,阳性率为47.5%(19/40)。免疫组织化学染色检出Hp-L型阳性有17例,检出率为42.5%(17/40),也具有一致性(P>0.05)。40例对照组中Hp-L型的检出13例,检出率为32.5%(13/40),可见胃癌组中Hp-L型感染的阳性率明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);经过统计数据分析得出胃癌组中Hp-L型感染仅仅与胃癌的淋巴结转移有关(P<0.05);而与胃癌肿块的大小、癌细胞的分化程度、浸润深度和TNM分期无关,与患者的年龄及性别也不具有相关性(P>0.05)。4.、应用Spearman等级相关对Smac蛋白、MDM2蛋白的表达阳性率进行分析,可发现Smac蛋白与MDM2蛋白的表达存在负相关性(r=-0.429,P<0.05)。5、胃癌组中Hp-L型感染阳性组中的Smac蛋白表达阳性率低于Hp-L型感染阴性组(P<0.05),通过相关分析发现,Hp-L型感染阳性与Smac蛋白的表达呈负相关(r=-0.316,P<0.05)。6、胃癌组织中Hp-L型阳性组同时MDM2表达也阳性的有59例,Hp-L阴性组中同时MDM2也表达阴性的例数为18例。经Spearman等级相关分析检验发现,Hp-L型感染和MDM2的表达呈正相关性(r=0.447,P<0.05)。结论:1、胃癌组织中Smac mRNA的表达水平较正常胃黏膜组织明显降低,而MDM2mRNA的表达水平比正常胃黏膜组织明显增高,并且两者均与胃癌细胞的分化程度、浸润深度及有无淋巴结转移有关,提示两者在胃癌浸润转移过程中发挥重要作用;2、Smac和MDM2的表达呈负相关性,可能在胃癌的发生过程中二者存在负向调节作用;3、Hp-L型在胃癌组织中的感染率增高提示其可能在胃癌的发生发展中具有重要作用;4、胃癌组Hp-L型感染与Smac蛋白的表达呈负相关,而与MDM2的表达呈正相关,三者可能共同参与了胃癌的发生、发展和转移。
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