依诺沙星为第三代喹诺酮类抗生素，具有广谱抗菌作用。国家食品药品监督管理局分别于2011年和2013年在《药品不良反应信息通报》第35、58期发布了关于氟喹诺酮类药品所导致的不良反应的信息通报。其不良反应主要表现为胃肠道反应、中枢神经系统反应、药物联合应用导致的不良反应。为进一步研究该品种产品质量状况，为不良反应产生的原因提供参考，提高原料及制剂生产过程中的质量控制，有关物质研究在该品种的质量分析中是重要且必要的。　　本研究采用高效液相色谱—三重串联四极杆质谱及超高分辨四极杆—傅里叶变换离子回旋共振串联质谱仪对依诺沙星主要有关物质进行结构鉴定及来源分析。采用高效液相色谱法测定75批依诺沙星制剂中的有关物质，确定含量不低于0.1％的主要杂质。采用Thermo AccucoreXLC18（4.6 mm×250 mm，4μm）及高效液相色谱—三重串联四极杆质谱，以0.1％甲酸溶液（含5 mmol·L-1醋酸铵）-甲醇-乙腈(86∶5∶9)为流动相A，以0.1％甲酸溶液（含5 mmol·L-1醋酸铵）-甲醇-乙腈(350∶325∶325)为流动相B进行梯度洗脱，对依诺沙星有关物质进行分离，并初步测定主要有关物质准分子离子峰的质荷比，在所建立的高效液相色谱-三重串联四极杆质谱条件下，依诺沙星及其有关物质可达到良好分离。进而，采用超高分辨四极杆傅里叶变换离子回旋共振串联质谱仪测定有关物质准确的母离子及子离子碎片，并结合对照品、裂解规律及生产工艺，对主要有关物质进行结构推定及来源分析。　　研究结果表明，依诺沙星制剂中3个主要有关物质均具有依诺沙星的1，8-萘啶母核结构，其来源分别与制剂工艺及原料药具有相关性。本研究对依诺沙星制剂中的主要有关物质进行了结构鉴定和来源分析，为改进生产工艺和提高产品质量提供了参考依据。