【摘 要】
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鸡胚在发育生物学科学研究中作为常用的脊椎动物模型,而肝脏一直作为生长发育和营养代谢的模型,对基础代谢以及基础研究的积累工作具有极其重要的意义:同时肝脏是禽类胚胎时期最
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鸡胚在发育生物学科学研究中作为常用的脊椎动物模型,而肝脏一直作为生长发育和营养代谢的模型,对基础代谢以及基础研究的积累工作具有极其重要的意义:同时肝脏是禽类胚胎时期最重要的代谢器官,是影响胚胎正常发育的重要一环。本实验采用常规HE染色、增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学染色、NOR(核仁组织区嗜银蛋白)、细胞凋亡等方法,揭示鸡胚发育过程中肝脏的变化过程,为肝脏的研究提供基础资料同时对鸡的育种和畜牧生产提供一定的理论依据。主要研究结果如下:
1.鸡胚孵化第8天时,肝间质细胞比率达到最大值(16.5%),随后下降并基本保持稳定,16天时比率又开始增大。
2.鸡胚肝细胞增殖的高峰期在孵化前7天(85%以上),此后迅速下降,并在孵化第9天后趋于平稳(30%),并且呈现区域性分布。
3.在鸡胚孵化的第5-8天,NOR颗粒较大;随着胚龄的增大,颗粒逐渐变小,在发育后期13-14天有增多趋势,NOR形态学分型以单一型为主。
4.在胚胎发育过程中,HE染色凋亡率在第12天达到最大值(5.65%),第9、10天差异显著;甲基绿—派洛宁染色、吖啶橙染色凋亡率较HE方法凋亡率高,二者变化趋势一致,均在第8天达到最大凋亡率。
结论:在鸡胚肝脏发育过程中,肝间质细胞在孵化早期生长增殖较慢,中后期增长较快提示肝脏早期肝细胞增殖为主到了后期则以间质细胞为主;PCNA与NOR是不同的指示细胞核特征方法,PCNA指示细胞增殖,NOR指示蛋白质合成相关的核仁,联合使用于胚胎发育研究可指示细胞的增殖与代谢;PCNA结果显示鸡胚肝脏发育过程中,前7天是肝脏增殖生长的主要阶段,此后迅速下降,孵化9天后趋于平稳并且分布呈现区域性;NOR颗粒形态学分型以单一型为主,随着孵化时间的不同NOR颗粒大小和数量均有变化:细胞的凋亡与增殖伴随发生,染色方法不同敏感性也有所不同。
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