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目的:苯妥英钠(Phenytoin Sodium，PHT-Na)，是抗癫痫大发作的首选药物，常用于抗癫痫、抗心律失常和抗轻度高血压等。但PHT-Na在临床应用时存在有效血药浓度范围窄，极易发生中毒，需要长期、规律、按时服药，还有可能诱导脑内外排转运体的表达上调等问题。
脂质体是由磷脂和胆固醇组成的具有双分子层结构的载体，药物荷载于其中可延缓药物代谢和清除，避免在血浆中降解，并能选择性地增加药物在预期作用部位的浓度，从而提高治疗指数。经过亲水性材料修饰的脂质体可逃避网状内皮细胞的捕获，增加在体内的循环时间，因而也被称为“隐形脂质体”。有些脂质体膜修饰剂还具有抑制外排转运蛋白等作用，从而更有利于药物靶向于脑部，显著增加脑内药物浓度。因此本课题将PHT-Na制备成脂质体以减少其注射的刺激性，并用Tween80和泊洛沙姆407(P407)作为膜修饰剂制备PHT-Na隐形脂质体，以期提高血浆药物浓度，延长其在体内的循环时间，促进药物入脑而增加在脑部位的浓度，达到减小给药剂量和次数、降低副作用的目的。
方法:初步采用薄膜分散法制备PHT-Na脂质体(PHT-Na-L)，建立微柱离心法测定脂质体包封率。进而以包封率为指标，分别考察主动载药法（硫酸铵梯度法和醋酸钙梯度法）和被动载药法（逆相蒸发法和薄膜分散法）制备PHT-Na-L，选择较好的制备方法。确定最优制备方法后，采用单因素实验考察对PHT-Na-L包封率影响较大的处方和工艺因素，确定大致水平范围。在此基础上，以包封率和载药量为评价指标，引入总评归一值(overall desirability，OD)作为综合评价指标，利用星点设计-效应面优化法筛选最优处方。
在最优处方的基础上，通过亲水性表面活性剂Tween80和P407修饰制备PHT-Na隐形脂质体(PHT-Na-Tween80-L和PHT-Na-P407-L)。采用溶出度仪分别考察PHT-Na溶液(PHT-Na-S)、PHT-Na-L、PHT-Na-P407-L和PHT-Na-Tween80-L的体外释放行为，绘制累积释放率对时间曲线，并进行模型拟合，初步探讨药物从脂质体中释放的机理。
大鼠尾静脉分别注射PHT-Na-S、PHT-Na-L、PHT-Na-P407-L和 PHT-Na-Tween80-L，收集不同时间点的血样或组织样品，建立高效液相法测定PHT-Na在血浆和各组织中的浓度，利用Kinetica4.4软件进行房室模型拟合，并采用单因素方差分析比较四种制剂在体内过程的差异。
将PHT-Na-L、PHT-Na-P407-L和PHT-Na-Tween80-L放置在不同温度和光照条件下，测定脂质体的渗漏率，观察外观和性状的变化，对脂质体的稳定性进行初步考察。
结果:Sephadex G-50微柱可以有效分离脂质体和游离药物，空白脂质体、PHT-Na溶液和脂质体中PHT-Na的过柱平均回收率分别为97.27％、99.59％和103.16％，满足脂质体包封率测定要求。四种制备方法所得PHT-Na脂质体包封率的高低顺序为:醋酸钙梯度法＞逆相蒸发法＞薄膜分散法＞硫酸铵梯度法。单因素考察结果显示对PHT-Na-L包封率影响较大的三个因素分别为药物/磷脂（m/m，X1），胆固醇/磷脂（m/m，X2）和醋酸钙浓度（mol·L-1，X3），经过优化后确定最优处方为:X1=0.12，X2=0.16，X3=0.12 mol·L-1。按最优处方制备PHT-Na-L的包封率和载药量分别为75.04±0.66％和7.26±0.06％，与预测值偏差较小，平均粒径为131.5nm。
体外释放结果显示PHT-Na-S在释放介质中释药最快，PHT-Na-L、PHT-Na-Tween80-L和PHT-Na-P407-L体外释放曲线均符合Weibull模型和一级释放模型。根据Weibull模型拟合方程计算PHT-Na-L，PHT-Na-Tween80-L和PHT-Na-P407-L体外药物释放63.2％所需时间td分别为6.59h、6.98h与8.83h，表明PHT-Na-L和PHT-Na-Tween80-L释放速率较为接近，而PHT-Na-P407-L释药速率相对缓慢。
体内房室模型拟合结果表明PHT-Na-S、PHT-Na-L、PHT-Na-P407-L和PHT-Na-Tween80-L的血药浓度-时间数据均符合权重为1/C2的二室模型。PHT-Na-S的药时曲线下面积(AUC)值为4873.38±545.54min·μg·mL-1，消除半衰期t1/2β为163.57±22.09 min，清除率CL为0.88±0.10 mL·min·μg-1。与PHT-Na-S的药动学参数比较，PHT-Na-L、PHT-Na-P407-L和PHT-Na-Tween80-L的AUC分别是PHT-Na-S的1.51、1.74和2.77倍，t1/2β是PHT-Na-S的1.31、1.59和2.87倍，而CL分别为0.64±0.06、0.51±0.03和0.33±0.12 mL·min·μg-1。不同制剂在1h和10h脑内药物浓度的先后顺序均为:PHT-Na-Tween80-L＞PHT-Na-P407-L＞PHT-Na-L＞PHT-Na-S，隐形脂质体组具有明显的脑靶向性。与PHT-Na-L相比，PHT-Na-Tween80-L和PHT-Na-P407-L组在肝、脾等吞噬细胞较丰富的器官中的药物浓度有所减小。此外，实验还发现脂质体具有一定的心脏靶向作用。
稳定性实验结果表明:温度和光照对脂质体的稳定性影响较大，在4℃和避光条件下贮存时比较稳定，为乳白色均匀的混悬液，渗漏率较小。
结论:微柱离心法可以有效分离脂质体和游离药物，适用于PHT-Na脂质体包封率的测定。采用醋酸钙梯度法制备PHT-Na脂质体可以显著提高包封率，应用星点设计-效应面优化法优选处方可以有效减少试验次数，准确合理地筛选出最优处方。所制备的脂质体在体外均具有明显的缓释性，在体内均可不同程度地延长药物的消除半衰期，增加在体内的循环时间，同时提高了药物的生物利用度。特别是PHT-Na-Tween80-L能较长时间在脑中维持较高的药物浓度，对于减少给药剂量和次数具有重要的意义。温度和光照对脂质体的稳定性影响较大，应该在低温避光的条件下保存。