肝脂溶颗粒对NAFLD大鼠血清TNF-α表达的影响

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目的:本课题采用高脂饮食复制大鼠非酒精性脂肪肝湿热瘀滞型模型,通过应用HE染色法检测实验造模成功与否、应用ELISA(酶联免疫吸附剂测定法)检测肝脂溶颗粒对大鼠肝脏组织病理学与大鼠血清TNF-α (肿瘤坏死因子-α)表达的的影响。探讨TNF-α与非酒精性脂肪肝的关系,论证肝脂溶颗粒对非酒精性脂肪肝干预的作用机制。方法:将清洁级Wistar大鼠60只,给予普通饲料喂养,适应实验室环境7天后随机分为2组,高脂组51只,普通组9只。高脂组给予高脂饲料(饲料组成:10%猪油、2%胆固醇、88%基础饲料)喂养,普通组给予普通饲料喂养。12周后,在高脂组与普通组各选出1只与6只大鼠,处死后迅速取肝脏组织进行HE染色,观察造模成功与否。剩余普通组大鼠(8只)继续给予普通饲料喂养。将剩余高脂组大鼠随机分为5组:模型组、对照组、中药高、中、低剂量组,每组9只大鼠。其中中药高、中、低剂量组与对照组每日继续高脂饲料喂养的同时给予不同药物进行灌胃;普通组和模型组给予生理盐水灌胃(lml/100g)。对照组给予以浓度的0.14g/kg的多烯磷脂酰胆碱胶囊水溶液灌胃;中药组分别给予不同剂量中药肝脂溶颗粒水溶液灌胃(浓度分别为:3g/kg、2.1g/kg、0.9g/kg)。以上六组大鼠每日记载体重、活动、进食等情况。连续灌胃4周后取材,取肝脏组织行HE染色,观察肝脏病理形态学改变;取动脉(腹主动脉)血清运用酶联免疫吸附测定血清TNF-α表达。结果:1.肝脂溶颗粒对NAFLD大鼠肝指数的影响高剂量组肝指数显著低于对照组(P<0.05);中剂量组肝指数与对照组相比,差别(P>0.05);低剂量组肝指数显著高于高、中剂量及对照组(P<0.05)。2.肝脂溶颗粒对NAFLD大鼠肝脏病理形态学的影响模型组大鼠肝脏组织脂肪变程度与正常组相比有显著性差异(p<0.01);应用药物灌胃大鼠(对照组、中药高、中、低剂量组)的肝脏组织的病理改变有不同程度的改善,肝细胞脂肪变数目和胞浆内脂滴的比例均有不同程度的减少,明显优于模型组(p<0.05);中药高剂量组大鼠肝脏组织病理学改善明显优于对照组(p<0.05);中药中剂量组大鼠肝脏组织脂肪变性程度与对照组相比,无明显差异(p>0.05);中药低剂量组与肝脂溶高、中剂量组及对照组相比,有明显差异(p<0.05)。3.肝脂溶颗粒对NAFLD大鼠血清TNF-α表达影响的研究各模型组大鼠血清TNF-α的表达显著高于正常组(P<0.01),具有统计学意义;模型组大鼠血清TNF-α的表达显著高于各药物干预组(P<0.01),具有统计学意义;高剂量组大鼠血清TNF-α的显著表达低于对照组(P<0.05),具有统计学意义;中剂量组大鼠血清TNF-α的表达与对照组相比较(P>0.05),无显著性统计学意义;低剂量组大鼠血清TNF-α的表达与高、中剂量组及对照组相比较(P<0.05),有统计学意义。结论:1NAFLD大鼠饲喂肝脂溶颗粒能改善原已病态的一般状态,明显减轻肝内脂质沉积,改善肝脂肪变性程度。2肝脂溶颗粒明显降低血清TNF-α表达。3肝脂溶颗粒通过减轻肝内脂质沉积,改善肝脂肪变性程度,抑制血清TNF-α表达,调节脂质代谢,促进脂肪酸氧化分解,减轻肝脏脂肪变性,从而发挥对非酒精性脂肪肝的治疗作用,这可能是肝脂溶颗粒防治非酒精性脂肪肝的机制之一。
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