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背景活化白细胞黏附分子(Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule,ALCAM)是免疫球蛋白基因超家族成员,主要表达在白细胞和胸腺上皮细胞。ALCAM为I型跨膜蛋白,其通过异嗜性黏附形式(ALCAM-CD6)和同嗜性黏附形式(ALCAM-ALCAM)介导细胞间黏附。既往研究表明ALCAM与肿瘤侵袭与转移密切相关,参与多种肿瘤的发生发展。目的本研究探讨ALCAM表达与肝细胞癌的相关性以及其在肝细胞癌发生发展中的作用。方法1.RT-PCR及免疫组化方法检测ALCAM基因在52例肝细胞癌组织及相应癌旁组织中的表达,分析ALCAM的表达与肝细胞癌临床病理特征的相关性。2.利用p SES-HUS系统构建特异性ALCAM基因的si RNA腺病毒载体p SES-ALCAM-si RNA,测序证实基因序列正确后包装成腺病毒si RNA并转染肝癌细胞株HepG2,应用RT-PCR和Western blot检测si RNA对肝癌细胞HepG2中ALCAM基因的干扰效果。3.MTT及流式细胞技术检测干扰ALCAM表达后HepG2细胞增殖及凋亡情况;Transwell实验检测HepG2迁移、侵袭能力改变。结果1.RT-PCR结果显示与癌旁正常组织相比较,ALCAM在肝细胞癌组织中的高表达(P<0.01)。免疫组化与临床资料统计分析进一步证实ALCAM与肿瘤分化程度(P=0.024),肝内转移(P=0.019)呈负相关,肝癌组织中ALCAM异常低表达提示肿瘤分化程度低,易转移;而与患者性别,年龄,术前AFP值,肿瘤直径及临床TNM分期无明显相关性(P>0.05)。2.构建腺病毒p SES-ALCAM-si RNA并转染HepG2,RT-PCR和Western blot显示ALCAM在基因及蛋白表达水平均被明显抑制。3.通过si RNA干扰肝癌细胞株HepG2中ALCAM基因表达,MTT及流式细胞术检测表明干扰ALCAM表达后肝癌细胞株HepG2增殖受到抑制(P<0.05),凋亡率增加(P<0.05);而Transwell实验发现ALCAM干扰后HepG2迁移、侵袭能力上升(P<0.05)。结论1.ALCAM在肝细胞癌组织中的高表达,并且与肝癌分化程度,肝内转移有相关性。这些数据表明ALCAM可能作为一个新指标诊断肝癌并且提示肿瘤分化程度及转移风险。2.腺病毒si RNA成功构建并可特异性干扰HepG2肝癌细胞株ALCAM基因表达,为后继实验进一步揭示ALCAM与肝癌的关系做准备。3.干扰ALCAM基因可抑制肝癌细胞HepG2增殖,促进其凋亡;然而HepG2肝癌细胞在ALCAM基因表达下调后体外迁移和侵袭能力增强,这意味着ALCAM基因在肝癌发生发展中有着多方面的作用,有重要研究价值。