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众所周知,bFGF对创伤修复领域的研究具有非常重要的意义,因其能够有效地促进伤口的愈合以及抑制瘢痕的形成,使其在医疗、美容领域具有良好的开发前景。但是目前市售的bFGF生长因子多数为原核及酵母系统表达,导致bFGF分离纯化成本高,蛋白不稳定,一旦溶解在溶液中,就必须储存在低温条件下(4℃),并在2周内使用完毕,不易保存。因此,开发bFGF新型表达纯化系统,改良bFGF的药物剂型,使其在室温条件下储存更加稳定具有重要的意义。本实验室选用植物油体作为bFGF的表达载体,分离纯化方法简单易操作。并选用冻干粉作为药物剂型,能够有效地延长产品的存储时间,方便产品的运输及储存,有效地降低了bFGF产品的生产和运输成本。为进一步确定融合表达bFGF蛋白的亚麻芥油体冻干粉(oleosin-bFGF)的稳定性和皮肤给药毒性,为后续oleosin-bFGF冻干粉产品的开发、质量和安全标准体系的建立奠定基础。本研究通过对oleosin-bFGF冻干粉的影响因素、加速稳定性和长期稳定性进行考察,确定其存储条件及存储时间;其次通过初步研究oleosin-bFGF冻干粉的急性和亚慢性皮肤给药毒性,对其进行药物安全性评价。主要研究结果如下:1.通过检测在60℃高温、高湿度及强光光照条件下放置的oleosin-bFGF冻干粉的各项指标发现,oleosin-bFGF冻干粉在高温、高湿条件下外观、镜检、pH值、蛋白含量以及促细胞增殖活性呈较明显的下降趋势;光照条件下以上检测指标变化不明显。说明oleosin-bFGF冻干粉主要在高温和高湿度环境下不稳定,因此oleosin-bFGF冻干粉在储存运输过程中应避免40℃以上高温,并采用真空密封包装,2.经加速稳定性实验(6个月)和长期稳定性实验(12个月),验证oleosin-bFGF冻干粉的外观,镜检,pH值,蛋白含量,促细胞增殖效果以及无菌检测结果均未发生明显变化。说明其常温稳定性良好,打破市售bFGF冻干粉只能低温保存的局限性。3.通过对大鼠一次性皮肤给药发现,即使是高剂量的oleosin-bFGF冻干粉对大鼠也无明显影响,所有大鼠均未出现中毒迹象,实验组大鼠活跃度正常,几乎没有可察觉的红斑及水肿。对实验组和对照组的体重变化及脏体比进行统计学分析无显著差异,oleosin-bFGF冻干粉的最大耐受剂量为2000 mg/kg。4.对大鼠连续皮肤给药28天发现,即使是持续给药的条件下,oleosin-bFGF冻干粉对大鼠的一般状态,体重变化,血常规及血液生化指标,脏器系数,组织病理学检查均无明显影响,所有大鼠均没有中毒迹象发生。说明oleosin-bFGF冻干粉皮肤给药安全性良好,符合OECD准则的要求,值得进一步研发推广。