基于过渡金属配合物荧光探针的合成及其活性的研究

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荧光分析法是一种以荧光探针为基础的分析方法,它具有灵敏度高、选择性好、测量参数和技术多样等优点,近年来受到了众多生物学和医学科研工作者的青睐。作为荧光分析法中比较常见的探针,过渡金属配合物荧光探针具有荧光寿命长、灵敏度高、Stokes位移大、光稳定性好等优点,已被应用于生物化学、药物分析和环境监测等领域。本论文的研究工作主要包括以下几个方面:1.在合成含镍(II)配合物[Ni(EDTB)]·2ClO4·2CH3CH2CH2CH2OH [N, N, N’, N’-四(2-苯并咪唑亚甲基)-1,2-乙二胺,简称EDTB]的基础上,我们采用荧光光谱法研究了该配合物对尿素水解的影响。发现该配合物具有催化水解尿素的活性,用质谱法探讨了配合物水解尿素的机理,较好地模拟了脲酶的功能。2.合成了两种含铜(II)配合物:配合物(1)——[Cu(IDB)2]Cl2·2CH3CH2OH·2H2O[N, N-二(2-苯并咪唑甲基)亚胺,简称IDB],配合物(2)——[Cu(EDTB)]·2[C6H4(OH)COO]·6H2O,用X射线单晶衍射法测定了其晶体结构。配合物(1)晶体结构分析表明,中心铜离子与两个配体IDB分子的四个苯并咪唑氮原子和两个胺基氮原子配位,形成一个六配位的畸变的八面体结构。配合物(2)晶体结构分析表明,中心铜离子与配体EDTB分子的四个苯并咪唑氮原子和两个胺基氮原子配位,形成一个六配位的畸变的八面体结构。这两种含铜(II)配合物均具有荧光属性,配合物(1)的最大发射波长是445nm,配合物(2)的最大发射波长是572nm。3.在非缓冲体系(水溶液)和不同的缓冲体系[0.01mol L-1磷酸盐缓冲溶液(pH=7.4),0.1mol L-1碳酸铵缓冲溶液(pH=8.9)]中,以生物素化铼(I)配合物——六氟磷酸化-N-4-吡啶-甲基氨基化生物素-三羰基-2,9-二甲基-4,7-二苯基-1,10-邻二氮杂菲合铼(I)(简写为Re-Biotin)为QTL探针(quencher-tether-ligand,猝灭剂-联接臂-配体,简称为QTL),考察Re-Biotin对水溶性阴离子荧光聚合物——聚(5-甲氧基-2-(3-磺酰化)丙氧基-1,4-对苯撑乙烯)(简写为MPS-PPV)的荧光猝灭作用及链亲和素加入后体系的荧光恢复作用,探讨了荧光猝灭及恢复机理。研究表明,在非缓冲体系和不同的缓冲体系中,Re-Biotin猝灭MPS-PPV荧光的机理可理解为Re-Biotin与MPS-PPV发生强烈的静电作用和电荷转移作用;链亲和素加入后的荧光恢复机理可理解为链亲和素与Re-Biotin中的生物素发生了特异性相互作用,将Re-Biotin拉离MPS-PPV。据此研制出基于水溶性荧光共轭聚合物MPS-PPV为敏感材料的链亲和素传感器,该传感器的传感机理具有稳定性,建立了特异、快速、高灵敏度的检测链亲和素的新方法。
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